Kit para teste de RNA do Pigeon Paramyxovirus Type 1 (PPMV-1) - RT-qPCR

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Número de catálogo: AP2409006Especificação: 50T / 100TArmazenamento: -20°C


Visão geral do produto:

O Kit de detecção de RNA do Pigeon Paramyxovirus Type 1 (PPMV-1) é uma ferramenta de diagnóstico RT-qPCR altamente sensível para identificar PPMV-1, e Vírus RNA que causa Doença de Newcastle em pombos. Os sinais clínicos nas aves infectadas incluem diarreia, paralisia das pernas, tremores e sintomas neurológicos.

O PPMV-1 é altamente contagiosoA doença é uma doença de pele, com alta taxa de morbidade e mortalidade. Ela se espalha rapidamente por meio de oral, respiratório, ocular, reprodutivo e até mesmo relacionado a ferimentos roteiros. A detecção oportuna e precisa é essencial para o controle da doença, a prevenção de infecções secundárias e a contenção de surtos.

Esse kit é baseado em sequências de genes conservados do PPMV-1 e foi otimizado para detecção rápida em swabs orais/cloacais, sangue e tecidos de pombos e outras espécies de aves por meio de transcrição reversa quantitativa em uma etapa PCR (RT-qPCR).


Principais recursos:

  • RT-qPCR em uma etapa para detecção direta de RNA

  • Aplicável a swabs, sangue (EDTA), homogenatos de tecidos

  • Inclui controles positivos e negativos

  • Resultados rápidos, alta sensibilidade e especificidade

  • Longo prazo de validade: ≥12 meses a -20°C

  • Ideal para criadores de pombos, laboratórios de aves e vigilância veterinária


Componentes do kit:

Componente50T100T
Tampão de reação PPMV-1575 µL1150 µL
PPMV-1 Premix575 µL1150 µL
Controle positivo de PPMV-1100 µL100 µL
Controle Negativo100 µL100 µL

Tipos e requisitos de amostras:

  • Swabs orais/loacais: Swabs estéreis armazenados a 2-8°C (dentro de 24 horas) ou -20°C

  • Sangue total: Somente para uso Anticoagulante EDTAEvite heparina; armazene ≤7 dias a 2-8°C ou ≤3 meses a -20°C

  • TecidosTecido muscular ou orgânico fresco: ≤100 mg de tecido muscular ou orgânico fresco, homogeneizado em 200-500 µL de água estéril

O RNA deve ser extraído usando o MD023 Kit de extração segura de RNA ou equivalente. O RNA extraído deve ser armazenado a 4°C (≤7 dias) ou -20°C (≤6 meses).


Configuração da reação de RT-qPCR:

  1. Descongele os reagentes e centrifugue brevemente.

  2. Para n amostras + 2 controles, mix:

    • (n+2) × 11,5 µL Tampão de reação PPMV-1

    • (n+2) × 11,5 µL PPMV-1 Premix

  3. Misture bem e distribua 23 µL por tubo de PCR

  4. Adicionar 2 µL de amostra de RNA, positivoou controle negativo

  5. Volume final da reação: 25 µL


Condições de ciclo de PCR:

EtapaTemperaturaTempo
Transcrição reversa50°C10 min
Pré-desenaturação95°C2 min
Amplificação de PCR (×40)95°C5 segundos
59°C35 segundos (canal FAM)

Compatível com a ABI e outras plataformas de PCR em tempo real. Corante ROX opcional.


Interpretação dos resultados:

  • Positivo: Ct ≤ 33 com curva "S" clara

  • Suspeita: 33 < Ct < 38 → recomendar novo teste

  • Negativo: Ct ≥ 38 ou nenhuma curva de amplificação

Requisitos de controle:

  • Controle positivo: Ct < 28

  • Controle negativo: Ct ≥ 38 ou nenhum valor de Ct


Precauções:

  1. Execute em zonas de trabalho separadas: Preparação de RNA, preparação de reagentes e amplificação de PCR

  2. Use luvas, jaleco de laboratório e pipetas e equipamentos separados para cada área

  3. Evite ciclos repetidos de congelamento e descongelamento; proteja os reagentes da luz

  4. Apenas para uso em pesquisa; não se destina a diagnóstico clínico

  5. Desinfete o espaço de trabalho e o equipamento regularmente com álcool, cloro ou UV


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Uma ferramenta essencial para criadores, laboratórios de diagnóstico e pesquisadores de doenças aviárias para proteger a saúde dos rebanhos e reduzir o risco de mortalidade decorrente de surtos de paramixovírus em pombos.

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