Kit de prueba de ARN del paramixovirus de la paloma tipo 1 (PPMV-1) - RT-qPCR

Descripción

Nº de catálogo AP2409006Especificación: 50T / 100TAlmacenamiento: -20°C


Resumen del producto:

En Kit de Detección del ARN del Paramixovirus de la Paloma Tipo 1 (PPMV-1) es una herramienta de diagnóstico RT-qPCR de alta sensibilidad para identificar PPMV-1, an Virus ARN que causa Enfermedad de Newcastle en palomas. Los signos clínicos en aves infectadas incluyen diarrea, parálisis de las piernas, temblores y síntomas neurológicos.

PPMV-1 es muy contagiosa, con una elevada tasa de morbilidad y mortalidad. Se propaga rápidamente a través de orales, respiratorias, oculares, reproductivas e incluso relacionadas con heridas. rutas. La detección oportuna y precisa es esencial para el control de la enfermedad, la prevención de infecciones secundarias y la contención de los brotes.

Este kit se basa en secuencias genéticas conservadas de PPMV-1 y se ha optimizado para detección rápida en hisopos orales/cloacales, sangre y tejidos de palomas y otras especies aviares mediante transcripción inversa cuantitativa en un paso PCR (RT-qPCR).


Características principales:

  • RT-qPCR de un paso para la detección directa de ARN

  • Aplicable a hisopos, sangre (EDTA), homogeneizados de tejidos

  • Incluye controles positivos y negativos

  • Resultados rápidos, alta sensibilidad y especificidad

  • Larga conservación: ≥12 meses a -20°C

  • Ideal para criadores de palomas, laboratorios aviares y vigilancia veterinaria


Componentes del kit:

Componente50T100T
Tampón de reacción PPMV-1575 µL1150 µL
Premezcla PPMV-1575 µL1150 µL
PPMV-1 Control positivo100 µL100 µL
Control negativo100 µL100 µL

Tipos de muestras y requisitos:

  • Hisopos bucales/cloacales: Torundas estériles almacenadas a 2-8°C (en 24h) o -20°C

  • Sangre total: Uso exclusivo Anticoagulante EDTA, evitar la heparina; conservar ≤7 días a 2-8°C o ≤3 meses a -20°C.

  • Tejidos: ≤100 mg de músculo fresco o tejido de órgano, homogeneizado en 200-500 µL de agua estéril.

El ARN debe extraerse utilizando el MD023 Kit de extracción segura de ARN o equivalente. El ARN extraído debe almacenarse a 4 °C (≤7 días) o -20 °C (≤6 meses).


Preparación de la reacción RT-qPCR:

  1. Descongelar los reactivos y centrifugar brevemente.

  2. Para n muestras + 2 controlesmezcla:

    • (n+2) × 11,5 µL Tampón de reacción PPMV-1

    • (n+2) × 11,5 µL Premezcla PPMV-1

  3. Mezclar bien y dispensar 23 µL por tubo PCR

  4. Añadir 2 µL de ARN de muestra, positivoo control negativo

  5. Volumen final de reacción: 25 µL


PCR Cycling Conditions:

PasoTemperaturaTiempo
Transcripción inversa50°C10 minutos
Pre-denaturalización95°C2 minutos
Amplificación PCR (×40)95°C5 segundos
59°C35 segundos (canal FAM)

Compatible con ABI y otras plataformas de PCR en tiempo real. Colorante ROX opcional.


Interpretación de los resultados:

  • Positivo: Ct ≤ 33 con curva "S" clara.

  • Sospecha de: 33 < Ct < 38 → recomiendan repetir la prueba.

  • Negativo: Ct ≥ 38 o sin curva de amplificación.

Requisitos de control:

  • Control positivo: Ct < 28

  • Control negativo: Ct ≥ 38 o sin valor Ct.


Precauciones:

  1. Realización en zonas de trabajo separadas: Preparación de ARN, preparación de reactivos y amplificación de PCR.

  2. Llevar guantes, bata de laboratorio y utilizar pipetas y equipos distintos para cada zona.

  3. Evitar ciclos repetidos de congelación-descongelación; proteger los reactivos de la luz

  4. Sólo para uso en investigación; no para diagnóstico clínico

  5. Desinfectar regularmente el lugar de trabajo y el equipo con alcohol, cloro o rayos UV.


🛒 Detectar el PPMV-1 de forma precoz y eficaz.
Una herramienta esencial para los criadores, los laboratorios de diagnóstico y los investigadores de enfermedades aviares para salvaguardar la salud de las bandadas y reducir el riesgo de mortalidad por brotes de paramixovirus de las palomas.

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