Kit de extracción de ADN/ARN total (método de columna centrífuga) para la prueba del virus de las aves

Descripción

Nº de catálogo: DP201-01 / DP201-02
Especificaciones: 25T / 50T
Almacenamiento: Temperatura ambiente (15-25°C)

Descripción del producto

En Kit de extracción de ADN/ARN total está diseñado para la purificación rápida y eficiente de ácidos nucleicos totales de alta calidad -incluyendo ADN/ARN viral, bacteriano y parasitario- a partir de una variedad de muestras biológicas como tejidos, sangre, secreciones y excrementos.

Utilización de tecnología de columna de centrifugado con membrana de síliceEl kit permite la extracción fiable de ácidos nucleicos sin necesidad de recurrir al tóxico fenol-cloroformo o a la precipitación con alcohol, que requieren mucho tiempo. Los ácidos nucleicos purificados son adecuados para una amplia gama de aplicaciones posteriores, incluyendo PCR, RT-PCR, LAMP/RT-LAMPy Southern/Northern blotting.

Principio del método

En condiciones de alta salinidad, los ácidos nucleicos se unen selectivamente a la membrana de sílice de la columna de centrifugación, mientras que las proteínas y las impurezas se eliminan por lavado. Tras múltiples pasos de lavado, el ADN/ARN de alta pureza se eluye utilizando agua tratada con DEPC, listo para su uso inmediato en flujos de trabajo de biología molecular.

Contenido del kit

⚠️ Nota: Añadir 20 ml (para 25T) o 40 ml (para 50T) de etanol absoluto al tampón de lavado antes del primer uso.

Tipos de muestras y preparación

• Sangre: Centrifugar >500 µL de sangre anticoagulada con EDTA, transferir 200 µL de plasma para extracción.

• Tejido: Homogeneizar 0,05-1 g de tejido en solución salina (5-10× volumen), tomar 200 µL de homogeneizado para procesar.

• Muestras fecales: Pasar la torunda por la zona de recogida después de humedecerla en solución salina. Separe la punta del hisopo en un tubo de solución salina de 1 mL, agite en vórtex 30 segundos y transfiera 200 µL.

Protocolo simplificado del kit de extracción

1. Mezclar 200 µl de muestra con 500 µl de tampón de lisis → incubar 5 min → centrifugar.

2. Transferir 400 µL de sobrenadante + 200 µL de etanol → vórtex.

3. Cargar en la columna de centrifugación A (en el tubo de recogida B) → centrifugar 1 min.

4. Desechar el flujo → añadir 600 µl de tampón de lavado → centrifugar 1 min.

5. Repita la centrifugación para secar la columna → transfiera la Columna A a un tubo nuevo.

6. Añadir 50 µl de tampón de elución → incubar 1-2 min → centrifugar → recoger ácidos nucleicos.

⏱️ Tiempo total: ~20-30 minutos
🧊 Almacenamiento de ácidos nucleicos purificados: Conservar a -80°C si no se utiliza inmediatamente.

Precauciones

• Para un solo uso; no reutilizar las columnas de centrifugado ni los tubos de recogida.

• Utilice guantes, bata de laboratorio y mascarilla durante la operación. Evite tocar los bordes de los tubos y las aberturas de las columnas.

• Desinfectar las superficies de trabajo y el equipo después de su uso con 1% hipoclorito de sodio o 75% etanol.

• Elimine los residuos biológicos de acuerdo con las normas de seguridad.

Aplicaciones de este kit de extracción de ADN/ARN total

• Extracción de ácidos nucleicos víricos y bacterianos

• Preparación de muestras para el diagnóstico aviar

• PCR, RT-PCR y amplificación isotérmica

• Laboratorios de investigación y diagnóstico veterinario

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