Kit de test ARN pour paramyxovirus du pigeon de type 1 (PPMV-1) - RT-qPCR

Description

N° de catalogue AP2409006Spécification : 50T / 100TStockage : -20°C

Aperçu du produit :

Les Kit de détection de l'ARN du paramyxovirus du pigeon de type 1 (PPMV-1) est un outil de diagnostic RT-qPCR très sensible pour l'identification de la maladie. PPMV-1, un Virus à ARN qui provoque Maladie de Newcastle chez les pigeons. Les signes cliniques chez les oiseaux infectés sont les suivants diarrhée, paralysie des jambes, tremblements et symptômes neurologiques.

PPMV-1 est très contagieuxLa maladie se propage rapidement par l'intermédiaire de l'eau, de l'air et du sol. Elle se propage rapidement par orale, respiratoire, oculaire, reproductive et même liée aux plaies itinéraires. Une détection rapide et précise est essentielle pour la lutte contre la maladie, la prévention des infections secondaires et l'endiguement des épidémies.

Ce kit est basé sur des séquences génétiques conservées du PPMV-1 et a été optimisé pour les applications suivantes détection rapide dans les écouvillons buccaux/cloacaux, le sang et les tissus de pigeons et d'autres espèces aviaires par l'intermédiaire de transcription inverse quantitative en une étape PCR (RT-qPCR).

Caractéristiques principales :

• RT-qPCR en une étape pour la détection directe de l'ARN

• Applicable à écouvillons, sang (EDTA), homogénats de tissus

• Comprend contrôles positifs et négatifs

• Résultats rapides, une sensibilité et une spécificité élevées

• Longue durée de conservation : ≥12 mois à -20°C

• Idéal pour les éleveurs de pigeons, les laboratoires aviaires et la surveillance vétérinaire.

Composants du kit :

Types d'échantillons et exigences :

• Écouvillons buccaux/cloacaux: Ecouvillons stériles conservés à 2-8°C (dans les 24h) ou -20°C

• Sang total: A utiliser uniquement Anticoagulant EDTAéviter l'héparine ; conserver ≤7 jours à 2-8°C ou ≤3 mois à -20°C

• TissusTissu musculaire : ≤100 mg de tissu musculaire ou organique frais, homogénéisé dans 200-500 µL d'eau stérile.

L'ARN doit être extrait à l'aide de la méthode MD023 Kit d'extraction d'ARN en toute sécurité ou équivalent. L'ARN extrait doit être conservé à 4°C (≤7 jours) ou à -20°C (≤6 mois).

Configuration de la réaction RT-qPCR :

1. Décongeler les réactifs et les centrifuger brièvement.

2. Pour n échantillons + 2 contrôles, mélange :

   • (n+2) × 11,5 µL Tampon de réaction PPMV-1

   • (n+2) × 11,5 µL PPMV-1 Premix

3. Bien mélanger et distribuer 23 µL par tube PCR

4. Ajouter 2 µL d'échantillon d'ARN, positifou contrôle négatif

5. Volume de réaction final : 25 µL

PCR Conditions de cyclage :

Compatible avec ABI et d'autres plateformes de PCR en temps réel. Colorant ROX en option.

Interprétation des résultats :

• Positif: Ct ≤ 33 avec courbe "S" claire

• Suspecté: 33 < Ct < 38 → recommander un nouveau test

• Négatif: Ct ≥ 38 ou pas de courbe d'amplification

Exigences en matière de contrôle:

• Contrôle positif : Ct < 28

• Contrôle négatif : Ct ≥ 38 ou pas de valeur de Ct

Précautions :

1. Effectuer les opérations dans des zones de travail séparées : Préparation de l'ARN, préparation des réactifs et amplification par PCR

2. Porter des gants, une blouse de laboratoire et utiliser des pipettes et du matériel distincts pour chaque zone.

3. Éviter les cycles répétés de congélation-décongélation ; protéger les réactifs de la lumière.

4. Réservé à la recherche ; ne doit pas être utilisé pour le diagnostic clinique

5. Désinfecter régulièrement l'espace de travail et l'équipement avec de l'alcool, du chlore ou des UV.

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Un outil essentiel pour les éleveurs, les laboratoires de diagnostic et les chercheurs spécialisés dans les maladies aviaires afin de préserver la santé des troupeaux et de réduire le risque de mortalité lié aux épidémies de paramyxovirus du pigeon.