ハトパラミクソウイルス1型(PPMV-1)RNA検査キット - RT-qPCR

説明

カタログ番号 AP2409006スペック 50T / 100Tストレージ: -20°C


製品の概要

について ハトパラミクソウイルス1型(PPMV-1)RNA検出キット を同定するための高感度RT-qPCR診断ツールである。 ピーピーエムブイワン(1)、(2)、(3)、(4) RNAウイルス 原因 ニューカッスル病 ハトの場合。感染した鳥の臨床症状には以下のようなものがある。 下痢、下肢麻痺、振戦、神経症状.

PPMV-1は 感染力が強い罹患率と死亡率が高い。この病気は 口腔、呼吸器、眼、生殖器、さらには創傷に関連する。 ルートタイムリーで正確な検出は、疾病管理、二次感染の予防、アウトブレイクの封じ込めに不可欠である。

このキットは、PPMV-1の保存された遺伝子配列に基づき、以下の目的に最適化されている。 口腔/鼻腔スワブ、血液、組織での迅速検出 ハトやその他の鳥類を経由して 一段階逆転写定量 PCR (RT-qPCR).


主な特徴

  • ワンステップRT-qPCR 直接RNA検出用

  • 対象 スワブ、血液(EDTA)、組織ホモジネート

  • 含まれるもの 陽性および陰性コントロール

  • 速い結果だ、 高感度、高特異性

  • 長期保存可能期間:-20℃で12ヶ月以上

  • 鳩ブリーダー、鳥類研究所、獣医監視に最適


キットの構成部品:

コンポーネント50T100T
PPMV-1 反応バッファー575 µL1150 µL
PPMV-1 プレミックス575 µL1150 µL
PPMV-1 陽性コントロール100 µL100 µL
陰性コントロール100 µL100 µL

サンプルの種類と条件

  • 口腔/咽頭スワブ:滅菌綿棒:2~8℃(24時間以内)または-20℃で保存。

  • 全血:のみ使用 EDTA抗凝固剤ヘパリンを避け、2~8℃で7日以内、または-20℃で3ヶ月以内に保存する。

  • 組織新鮮な筋肉または臓器組織100 mg以下を200-500 µLの滅菌水でホモジナイズする。

RNAは MD023 安全なRNA抽出キット または同等品。抽出したRNAは4℃(~7日)または-20℃(~6ヶ月)で保存する。


RT-qPCR反応セットアップ:

  1. 試薬を解凍し、短時間遠心する。

  2. について nサンプル+2コントロールミックス:

    • (n+2) × 11.5 µL PPMV-1 反応バッファー

    • (n+2) × 11.5 µL PPMV-1 プレミックス

  3. よく混ぜて分注する 23 µL PCRチューブあたり

  4. 追加 サンプルRNA 2 µL, ポジティブあるいは ネガティブコントロール

  5. 最終反応量: 25 µL


PCRサイクリング条件:

ステップ温度時間
逆転写50°C10分
変性前95°C2分
PCR増幅(40倍)95°C5秒
59°C35秒(FAMチャンネル)

ABIおよびその他のリアルタイムPCRプラットフォームに対応。ROX色素はオプション


結果の解釈

  • ポジティブ:Ct≦33、明確な "S "カーブを描く

  • 疑わしい:33 < Ct < 38 →再検査を推奨

  • ネガティブ:Ct≧38 または増幅曲線なし

管理要件:

  • 陽性コントロールCt < 28

  • 陰性コントロールCt≧38またはCt値なし


注意事項

  1. 別々の作業ゾーンで行う:RNA前処理、試薬のセットアップ、PCR増幅

  2. 手袋、白衣を着用し、各分野で別々のピペットや器具を使用する。

  3. 凍結融解の繰り返しを避け、試薬を遮光する。

  4. 研究目的のみ。臨床診断を目的としたものではない

  5. アルコール、塩素、紫外線などで作業スペースや器具を定期的に消毒する。


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