Kit per il test dell'RNA del Paramyxovirus dei piccioni di tipo 1 (PPMV-1) - RT-qPCR

Descrizione

Numero di catalogo: AP2409006Specifiche: 50T / 100TStoccaggio: -20°C

Panoramica del prodotto:

Il Kit per il rilevamento dell'RNA del Paramyxovirus dei piccioni di tipo 1 (PPMV-1) è uno strumento diagnostico RT-qPCR altamente sensibile per l'identificazione di PPMV-1, un Virus a RNA che provoca Malattia di Newcastle nei piccioni. I segni clinici nei volatili infetti comprendono diarrea, paralisi delle gambe, tremori e sintomi neurologici.

PPMV-1 è altamente contagiosocon un alto tasso di morbilità e mortalità. Si diffonde rapidamente attraverso orale, respiratorio, oculare, riproduttivo e persino legato alle ferite. percorsi. Una rilevazione tempestiva e accurata è essenziale per il controllo della malattia, la prevenzione delle infezioni secondarie e il contenimento dei focolai.

Questo kit si basa su sequenze geniche conservate di PPMV-1 ed è stato ottimizzato per rilevamento rapido in tamponi orali/cloacali, sangue e tessuti di piccioni e altre specie avicole tramite trascrizione inversa quantitativa one-step PCR (RT-qPCR).

Caratteristiche principali:

• RT-qPCR in un solo passaggio per il rilevamento diretto dell'RNA

• Applicabile a tamponi, sangue (EDTA), omogenati di tessuto

• Include controlli positivi e negativi

• Risultati rapidi, elevata sensibilità e specificità

• Lunga durata di conservazione: ≥12 mesi a -20°C

• Ideale per gli allevatori di piccioni, i laboratori di avicoltura e la sorveglianza veterinaria

Componenti del kit:

Tipi di campioni e requisiti:

• Tamponi orali e cloacali: Tamponi sterili conservati a 2-8°C (entro 24 ore) o a -20°C.

• Sangue intero: Utilizzare solo Anticoagulante EDTAevitare l'eparina; conservare ≤7 giorni a 2-8°C o ≤3 mesi a -20°C.

• Tessuti≤100 mg di tessuto muscolare o d'organo fresco, omogeneizzato in 200-500 µL di acqua sterile.

L'RNA deve essere estratto utilizzando il metodo MD023 Kit per l'estrazione sicura dell'RNA o equivalente. L'RNA estratto deve essere conservato a 4°C (≤7 giorni) o a -20°C (≤6 mesi).

Impostazione della reazione RT-qPCR:

1. Scongelare i reagenti e centrifugare brevemente.

2. Per n campioni + 2 controlli, mix:

   • (n+2) × 11,5 µL Tampone di reazione PPMV-1

   • (n+2) × 11,5 µL PPMV-1 Premiscela

3. Mescolare bene ed erogare 23 µL per provetta PCR

4. Aggiungi 2 µL di RNA campione, positivo, o controllo negativo

5. Volume di reazione finale: 25 µL

Condizioni di ciclaggio PCR:

Compatibile con ABI e altre piattaforme di PCR in tempo reale. Colorante ROX opzionale.

Interpretazione dei risultati:

• Positivo: Ct ≤ 33 con curva a "S" chiara

• Sospetto: 33 < Ct < 38 → raccomandare di ripetere il test

• Negativo: Ct ≥ 38 o nessuna curva di amplificazione

Requisiti di controllo:

• Controllo positivo: Ct < 28

• Controllo negativo: Ct ≥ 38 o nessun valore Ct

Precauzioni:

1. Eseguire in zone di lavoro separate: Preparazione dell'RNA, preparazione dei reagenti e amplificazione PCR.

2. Indossare guanti, camice da laboratorio e utilizzare pipette e attrezzature separate per ogni area.

3. Evitare cicli ripetuti di congelamento e scongelamento; proteggere i reagenti dalla luce.

4. Solo per uso di ricerca; non è destinato alla diagnosi clinica.

5. Disinfettare regolarmente l'area di lavoro e le attrezzature con alcol, cloro o raggi UV.

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