Kit per il test dell'influenza aviaria (virus sottotipo H1N1) Kit per il rilevamento con PCR in tempo reale

Descrizione

Nome del prodotto (EN): Influenza aviaria Kit di test
Dimensioni della confezione: 50 test
Prezzo: Contattate le nostre vendite
Stoccaggio: Trasportare a bassa temperatura; conservare a -20°C, valido per 12 mesi
Spedizione da: Shanghai, Cina
Solo per uso di ricerca


Panoramica del kit per il test dell'influenza aviaria

Questo kit per il test dell'influenza aviaria è stato progettato specificamente per il rilevazione qualitativa e quantitativa dell'RNA del virus dell'influenza A sottotipo H1N1 utilizzando tecnologia qRT-PCR fluorescente basata su sonde. Mirando alle regioni genetiche conservate del sottotipo H1N1, il kit offre un'elevata specificità e sensibilità nel rilevare il virus dell'influenza aviaria A da campioni biologici e ambientali.

A differenza della PCR basata sul colorante SYBR Green, questa Sistema basato su sonda TaqMan utilizza sonde marcate in fluorescenza che emettono segnali solo all'atto dell'ibridazione e del clivaggio durante l'amplificazione, assicurando così specificità superiore e minori tassi di falsi positivi.


Caratteristiche principali

Altamente specifico e sensibile - Progettato sulla base di regioni altamente conservate del genoma dell'H1N1; nessuna reazione incrociata con i virus non bersaglio.
Sistema pronto all'uso - Richiede solo un modello di RNA da parte dell'utente
Primer e sonde ottimizzati - Garantisce un'amplificazione e un rilevamento efficienti
Controllo positivo incluso - DNA sintetico non infettivo per la validazione dei risultati
Applicazioni quantitative e qualitative - Adatto per la ricerca, la sorveglianza e lo screening
Compatibile con i principali strumenti qPCR - Rilevazione della fluorescenza sul canale FAM


Contenuto del kit (50 test)

Descrizione del componenteCodiceVolume e colore del tappo
Tampone qRT-PCR (sistema di sonde)A500 µL
Miscela enzimatica qRT-PCRB100 µL
Tampone di diluizione del templato PCRC1 ml
Miscela di primer qRT-PCR per H1N1D100 µL
Sonda per il sottotipo H1N1E50 µL
DNA di controllo positivo (1×10⁸ copie/μL)F50 µL
Reagente di rilascio dell'RNA (metodo di prova, senza estrazione)G20 test
Manuale d'usoH1 copia

Come funziona

Il kit rileva l'RNA virale attraverso una reazione di PCR a trascrizione inversa in un unico passaggio. Durante l'amplificazione, il La Taq polimerasi taglia la sonda a doppia marcaturaseparando il fluoroforo dal quencher, con conseguente segnale di fluorescenza proporzionale alla quantità di RNA target presente.

La fluorescenza viene misurata durante ogni ciclo, consentendo di monitoraggio in tempo reale del processo di PCR.


Principio di rilevamento

  • Valore Ct (soglia di ciclo): Numero di cicli di PCR necessari affinché la fluorescenza superi la soglia. Un Ct più basso indica una quantità iniziale di target più elevata.

  • Impostazione della soglia: In base alla deviazione standard 10× della fluorescenza dei 3-15 cicli iniziali (background).


Prestazioni e criteri di esclusione

Tipo di risultatoCriteri
PositivoCt ≤ 35 con una tipica curva di amplificazione a S
Sospetto positivoCt 35-40 → Si consiglia di ripetere il test
NegativoCt ≥ 40 o nessun Ct + nessuna curva di amplificazione

I controlli positivi e negativi devono superare i controlli di qualità. Ct del controllo negativo ≥40 e Ct del controllo positivo ≤30 con amplificazione esponenziale.


Protocollo di reazione

Trascrizione inversa + PCR (20 μL per reazione)

ReagenteVolume
Tampone qRT-PCR10 μL
Miscela di enzimi2 μL
Miscela di primer2 μL
Sonda1 μL
Templato di RNA o controllo5 μL
  • Volume totale: 20 μL

  • Condizioni di ciclaggio termico:

PassoTemperaturaTempo
Trascrizione inversa50°C30 min
Denaturazione iniziale94°C10 min
Ciclo di PCR × 40
- Denaturazione94°C15 secondi
- Ricottura/estensione60°C1 min (FAM)

Quantificazione (opzionale)

Preparare un curva standard utilizzando diluizioni seriali di 10 volte (10²-10⁷ copie/μL) del controllo di DNA sintetico. Tracciare i valori Ct rispetto al log(concentrazione) per interpolare il numero di copie di RNA nei campioni sconosciuti.


Vantaggi della PCR basata su sonde rispetto al SYBR Green:

CaratteristicaVerde SYBRBasato su sonda (questo kit)
SpecificitàLega tutti i dsDNASi lega solo a una specifica sequenza bersaglio
Rischio di falsi positiviPiù altoPiù basso
CostoPiù bassoPiù alto (ma più affidabile)
Facilità d'usoPiù sempliceRichiede la progettazione della sonda

Uso previsto

Questo prodotto è solo a scopo di ricerca. Non è approvato per diagnostica clinica o procedure terapeutiche.

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