Kit per il test dell'influenza aviaria (virus sottotipo H1N1) Kit per il rilevamento con PCR in tempo reale
Descrizione
Nome del prodotto (EN): Influenza aviaria Kit di test
Dimensioni della confezione: 50 test
Prezzo: Contattate le nostre vendite
Stoccaggio: Trasportare a bassa temperatura; conservare a -20°C, valido per 12 mesi
Spedizione da: Shanghai, Cina
Solo per uso di ricerca
Panoramica del kit per il test dell'influenza aviaria
Questo kit per il test dell'influenza aviaria è stato progettato specificamente per il rilevazione qualitativa e quantitativa dell'RNA del virus dell'influenza A sottotipo H1N1 utilizzando tecnologia qRT-PCR fluorescente basata su sonde. Mirando alle regioni genetiche conservate del sottotipo H1N1, il kit offre un'elevata specificità e sensibilità nel rilevare il virus dell'influenza aviaria A da campioni biologici e ambientali.
A differenza della PCR basata sul colorante SYBR Green, questa Sistema basato su sonda TaqMan utilizza sonde marcate in fluorescenza che emettono segnali solo all'atto dell'ibridazione e del clivaggio durante l'amplificazione, assicurando così specificità superiore e minori tassi di falsi positivi.
Caratteristiche principali
✅ Altamente specifico e sensibile - Progettato sulla base di regioni altamente conservate del genoma dell'H1N1; nessuna reazione incrociata con i virus non bersaglio.
✅ Sistema pronto all'uso - Richiede solo un modello di RNA da parte dell'utente
✅ Primer e sonde ottimizzati - Garantisce un'amplificazione e un rilevamento efficienti
✅ Controllo positivo incluso - DNA sintetico non infettivo per la validazione dei risultati
✅ Applicazioni quantitative e qualitative - Adatto per la ricerca, la sorveglianza e lo screening
✅ Compatibile con i principali strumenti qPCR - Rilevazione della fluorescenza sul canale FAM
Contenuto del kit (50 test)
| Descrizione del componente | Codice | Volume e colore del tappo |
|---|---|---|
| Tampone qRT-PCR (sistema di sonde) | A | 500 µL |
| Miscela enzimatica qRT-PCR | B | 100 µL |
| Tampone di diluizione del templato PCR | C | 1 ml |
| Miscela di primer qRT-PCR per H1N1 | D | 100 µL |
| Sonda per il sottotipo H1N1 | E | 50 µL |
| DNA di controllo positivo (1×10⁸ copie/μL) | F | 50 µL |
| Reagente di rilascio dell'RNA (metodo di prova, senza estrazione) | G | 20 test |
| Manuale d'uso | H | 1 copia |
Come funziona
Il kit rileva l'RNA virale attraverso una reazione di PCR a trascrizione inversa in un unico passaggio. Durante l'amplificazione, il La Taq polimerasi taglia la sonda a doppia marcaturaseparando il fluoroforo dal quencher, con conseguente segnale di fluorescenza proporzionale alla quantità di RNA target presente.
La fluorescenza viene misurata durante ogni ciclo, consentendo di monitoraggio in tempo reale del processo di PCR.
Principio di rilevamento
Valore Ct (soglia di ciclo): Numero di cicli di PCR necessari affinché la fluorescenza superi la soglia. Un Ct più basso indica una quantità iniziale di target più elevata.
Impostazione della soglia: In base alla deviazione standard 10× della fluorescenza dei 3-15 cicli iniziali (background).
Prestazioni e criteri di esclusione
| Tipo di risultato | Criteri |
|---|---|
| Positivo | Ct ≤ 35 con una tipica curva di amplificazione a S |
| Sospetto positivo | Ct 35-40 → Si consiglia di ripetere il test |
| Negativo | Ct ≥ 40 o nessun Ct + nessuna curva di amplificazione |
I controlli positivi e negativi devono superare i controlli di qualità. Ct del controllo negativo ≥40 e Ct del controllo positivo ≤30 con amplificazione esponenziale.
Protocollo di reazione
Trascrizione inversa + PCR (20 μL per reazione)
| Reagente | Volume |
|---|---|
| Tampone qRT-PCR | 10 μL |
| Miscela di enzimi | 2 μL |
| Miscela di primer | 2 μL |
| Sonda | 1 μL |
| Templato di RNA o controllo | 5 μL |
Volume totale: 20 μL
Condizioni di ciclaggio termico:
| Passo | Temperatura | Tempo |
|---|---|---|
| Trascrizione inversa | 50°C | 30 min |
| Denaturazione iniziale | 94°C | 10 min |
| Ciclo di PCR × 40 | ||
| - Denaturazione | 94°C | 15 secondi |
| - Ricottura/estensione | 60°C | 1 min (FAM) |
Quantificazione (opzionale)
Preparare un curva standard utilizzando diluizioni seriali di 10 volte (10²-10⁷ copie/μL) del controllo di DNA sintetico. Tracciare i valori Ct rispetto al log(concentrazione) per interpolare il numero di copie di RNA nei campioni sconosciuti.
Vantaggi della PCR basata su sonde rispetto al SYBR Green:
| Caratteristica | Verde SYBR | Basato su sonda (questo kit) |
|---|---|---|
| Specificità | Lega tutti i dsDNA | Si lega solo a una specifica sequenza bersaglio |
| Rischio di falsi positivi | Più alto | Più basso |
| Costo | Più basso | Più alto (ma più affidabile) |
| Facilità d'uso | Più semplice | Richiede la progettazione della sonda |
Uso previsto
Questo prodotto è solo a scopo di ricerca. Non è approvato per diagnostica clinica o procedure terapeutiche.






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