Kit de détection PCR en temps réel de la grippe aviaire (virus de sous-type H1N1)
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Nom du produit (EN) : Grippe aviaire Kit de test
Taille de l'emballage : 50 tests
Prix : Contacter notre service commercial
Stockage : Transport à basse température ; stockage à -20°Cvalable 12 mois
Expédition à partir de : Shanghai, Chine
Réservé à la recherche
Vue d'ensemble du kit de test pour la grippe aviaire
Ce kit de test de l'influenza aviaire est spécialement conçu pour l'analyse de l'influenza aviaire. détection qualitative et quantitative de l'ARN du sous-type H1N1 du virus de la grippe A en utilisant technologie qRT-PCR fluorescente basée sur des sondes. En ciblant les régions génétiques conservées du sous-type H1N1, le kit offre une spécificité et une sensibilité élevées pour la détection du virus de la grippe aviaire A dans les échantillons biologiques et environnementaux.
Contrairement à la PCR basée sur le colorant SYBR Green, cette Système à base de sondes TaqMan utilise des sondes marquées par fluorescence qui émettent des signaux uniquement lors de l'hybridation et du clivage au cours de l'amplification, ce qui garantit que spécificité supérieure et des taux de faux positifs plus faibles.
Caractéristiques principales
✅ Très spécifique et sensible - Conçu sur la base de régions hautement conservées du génome H1N1 ; pas de réaction croisée avec des virus non ciblés
✅ Système prêt à l'emploi - Nécessite uniquement un modèle d'ARN de la part de l'utilisateur
✅ Amorces et sondes optimisées - Assure une amplification et une détection efficaces
✅ Contrôle positif inclus - ADN synthétique non infectieux pour la validation des résultats
✅ Applications quantitatives et qualitatives - Convient à la recherche, à la surveillance et au dépistage
✅ Compatible avec les principaux instruments qPCR - Détection de la fluorescence sur le canal FAM
Contenu du kit (50 tests)
Description du composant | Code | Volume et couleur du bouchon |
---|---|---|
Tampon qRT-PCR (système de sonde) | A | 500 µL |
Mélange enzymatique pour qRT-PCR | B | 100 µL |
Tampon de dilution du modèle PCR | C | 1 ml |
Mélange d'amorces qRT-PCR pour le H1N1 | D | 100 µL |
Sonde pour le sous-type H1N1 | E | 50 µL |
ADN de contrôle positif (1×10⁸ copies/μL) | F | 50 µL |
Réactif de libération de l'ARN (essai, méthode sans extraction) | G | 20 essais |
Manuel de l'utilisateur | H | 1 exemplaire |
Comment ça marche
Le kit détecte l'ARN viral par une réaction PCR de transcription inverse en une seule étape. Pendant l'amplification, l'ARN La Taq polymérase clive la sonde à double marquageL'ARN cible est un ARN qui se trouve à l'intérieur de l'appareil et qui sépare le fluorophore du quencher, ce qui produit un signal de fluorescence proportionnel à la quantité d'ARN cible présente.
La fluorescence est mesurée au cours de chaque cycle, ce qui permet suivi en temps réel du processus PCR.
Principe de détection
Valeur Ct (seuil de cycle) : Nombre de cycles PCR nécessaires pour que la fluorescence dépasse le seuil. Un Ct plus bas indique une quantité cible initiale plus élevée.
Réglage du seuil : Basé sur une déviation standard de 10× la fluorescence des 3-15 cycles initiaux (fond).
Critères de performance et d'exclusion
Type de résultat | Critères |
---|---|
Positif | Ct ≤ 35 avec une courbe d'amplification typique en forme de S |
Susceptible d'être positif | Ct 35-40 → Répétition du test recommandée |
Négatif | Ct ≥ 40 ou pas de Ct + pas de courbe d'amplification |
Les contrôles positifs et négatifs doivent passer les contrôles de qualité. Ct du contrôle négatif ≥40 et Ct du contrôle positif ≤30 avec amplification exponentielle.
Protocole de réaction
Transcription inverse + PCR (20 μL par réaction)
Réactif | Volume |
---|---|
Tampon qRT-PCR | 10 μL |
Mélange d'enzymes | 2 μL |
Mélange d'amorces | 2 μL |
Sonde | 1 μL |
Modèle d'ARN ou contrôle | 5 μL |
Volume total : 20 μL
Conditions de cyclage thermique :
Étape | Température | L'heure |
---|---|---|
Transcription inversée | 50°C | 30 minutes |
Dénaturation initiale | 94°C | 10 min |
Cyclage PCR × 40 | ||
- Dénaturation | 94°C | 15 secondes |
- Recuit/extension | 60°C | 1 min (FAM) |
Quantification (facultatif)
Préparer un courbe standard en utilisant des dilutions en série de 10 fois (10²-10⁷ copies/μL) du contrôle ADN synthétique. Tracer les valeurs Ct en fonction du log(concentration) pour interpoler le nombre de copies d'ARN dans les échantillons inconnus.
Avantages de la PCR à base de sondes par rapport au SYBR Green :
Fonctionnalité | Vert SYBR | Basé sur une sonde (ce kit) |
---|---|---|
Spécificité | Se lie à tous les ADNdb | Se lie uniquement à une séquence cible spécifique |
Risque de faux positifs | Plus élevé | Plus bas |
Coût | Plus bas | Plus élevé (mais plus fiable) |
Facilité d'utilisation | Plus simple | Nécessite la conception d'une sonde |
Utilisation prévue
Ce produit est à des fins de recherche uniquement. Il n'est pas approuvé pour diagnostics cliniques ou des procédures thérapeutiques.
Avis
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