Kit de prueba de detección de la gripe aviar (subtipo de virus H1N1) por PCR en tiempo real

Descripción

Nombre del producto (EN): Gripe aviar Kit de prueba
Tamaño del paquete: 50 pruebas
Precio: Contacte con Ventas
Almacenamiento: Transportar a baja temperatura; almacenar a -20°Cválido durante 12 meses
Envío desde: Shanghai, China
Sólo para investigación


Descripción general del kit de prueba de la gripe aviar

Este kit de prueba de la gripe aviar está diseñado específicamente para la detección cualitativa y cuantitativa del ARN del subtipo H1N1 del virus de la gripe A utilizando tecnología qRT-PCR fluorescente basada en sondas. Al dirigirse a regiones genéticas conservadas del subtipo H1N1, el kit ofrece una alta especificidad y sensibilidad en la detección del virus de la gripe aviar A a partir de muestras biológicas y ambientales.

A diferencia de la PCR basada en el colorante SYBR Green, esta Sistema basado en sonda TaqMan utiliza sondas marcadas con fluorescencia que emiten señales sólo tras la hibridación y la escisión durante la amplificación, lo que garantiza especificidad superior y menores tasas de falsos positivos.


Características principales

Altamente específico y sensible - Diseñado a partir de regiones altamente conservadas del genoma H1N1; sin reacción cruzada con virus no diana.
Sistema listo para usar - Sólo requiere una plantilla de ARN del usuario
Cebadores y sondas optimizados - Garantiza una amplificación y detección eficaces
Control positivo incluido - ADN sintético no infeccioso para la validación de resultados
Aplicaciones cuantitativas y cualitativas - Adecuado para investigación, vigilancia y cribado
Compatible con los principales instrumentos de qPCR - Detección de fluorescencia en el canal FAM


Contenido del kit (50 pruebas)

Descripción del componenteCódigoVolumen y color del tapón
Tampón qRT-PCR (sistema de sondas)A500 µL
Mezcla enzimática qRT-PCRB100 µL
Tampón de dilución de plantillas PCRC1 ml
qRT-PCR Primer Mix para H1N1D100 µL
Sonda para el subtipo H1N1E50 µL
ADN de control positivo (1×10⁸ copias/μL)F50 µL
Reactivo de liberación de ARN (ensayo, método sin extracción)G20 pruebas
Manual del usuarioH1 ejemplar

Cómo funciona

El kit detecta el ARN viral mediante una reacción de PCR de transcripción inversa de un solo paso. Durante la amplificación, el La Taq polimerasa escinde la sonda doblemente marcadaEl resultado es una señal de fluorescencia proporcional a la cantidad de ARN diana presente.

La fluorescencia se mide durante cada ciclo, lo que permite control en tiempo real del proceso de PCR.


Principio de detección

  • Valor Ct (Umbral de ciclo): Número de ciclos de PCR necesarios para que la fluorescencia supere el umbral. Un Ct más bajo indica una mayor cantidad diana inicial.

  • Ajuste del umbral: Basado en una desviación estándar de 10× de la fluorescencia de los 3-15 ciclos iniciales (fondo).


Rendimiento y criterios de corte

Tipo de resultadoCriterios
PositivoCt ≤ 35 con una curva de amplificación típica en forma de S.
Sospechoso PositivoCt 35-40 → Se recomienda repetir la prueba
NegativoCt ≥ 40 o sin Ct + sin curva de amplificación.

Los controles positivos y negativos deben superar controles de calidad. Ct del control negativo ≥40 y del control positivo Ct ≤30 con amplificación exponencial.


Protocolo de reacción

Transcripción inversa + PCR (20 μL por reacción)

ReactivoVolumen
Tampón qRT-PCR10 μL
Mezcla de enzimas2 μL
Mezcla de imprimación2 μL
Sonda1 μL
Plantilla de ARN o control5 μL
  • Volumen total: 20 μL

  • Condiciones de ciclado térmico:

PasoTemperaturaTiempo
Transcripción inversa50°C30 min
Desnaturalización inicial94°C10 minutos
Ciclado PCR × 40
- Desnaturalización94°C15 segundos
- Recocido/Extensión60°C1 min (FAM)

Cuantificación (opcional)

Prepare un curva estándar utilizando diluciones seriadas 10 veces (10²-10⁷ copias/μL) del control de ADN sintético. Represente gráficamente los valores Ct frente al log(concentración) para interpolar los números de copias de ARN en muestras desconocidas.


Ventajas de la PCR basada en sondas sobre SYBR Green:

CaracterísticaVerde SYBRBasado en sonda (este kit)
EspecificidadSe une a todos los dsADNSe une sólo a una secuencia diana específica
Riesgo de falsos positivosMás altoBaja
CosteBajaMás alto (pero más fiable)
Facilidad de usoMás sencilloRequiere diseño de sonda

Uso previsto

Este producto es sólo con fines de investigación. No está aprobado para diagnóstico clínico o procedimientos terapéuticos.

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