Kit de prueba de detección de la gripe aviar (subtipo de virus H1N1) por PCR en tiempo real
Descripción
Nombre del producto (EN): Gripe aviar Kit de prueba
Tamaño del paquete: 50 pruebas
Precio: Contacte con Ventas
Almacenamiento: Transportar a baja temperatura; almacenar a -20°Cválido durante 12 meses
Envío desde: Shanghai, China
Sólo para investigación
Descripción general del kit de prueba de la gripe aviar
Este kit de prueba de la gripe aviar está diseñado específicamente para la detección cualitativa y cuantitativa del ARN del subtipo H1N1 del virus de la gripe A utilizando tecnología qRT-PCR fluorescente basada en sondas. Al dirigirse a regiones genéticas conservadas del subtipo H1N1, el kit ofrece una alta especificidad y sensibilidad en la detección del virus de la gripe aviar A a partir de muestras biológicas y ambientales.
A diferencia de la PCR basada en el colorante SYBR Green, esta Sistema basado en sonda TaqMan utiliza sondas marcadas con fluorescencia que emiten señales sólo tras la hibridación y la escisión durante la amplificación, lo que garantiza especificidad superior y menores tasas de falsos positivos.
Características principales
✅ Altamente específico y sensible - Diseñado a partir de regiones altamente conservadas del genoma H1N1; sin reacción cruzada con virus no diana.
✅ Sistema listo para usar - Sólo requiere una plantilla de ARN del usuario
✅ Cebadores y sondas optimizados - Garantiza una amplificación y detección eficaces
✅ Control positivo incluido - ADN sintético no infeccioso para la validación de resultados
✅ Aplicaciones cuantitativas y cualitativas - Adecuado para investigación, vigilancia y cribado
✅ Compatible con los principales instrumentos de qPCR - Detección de fluorescencia en el canal FAM
Contenido del kit (50 pruebas)
| Descripción del componente | Código | Volumen y color del tapón |
|---|---|---|
| Tampón qRT-PCR (sistema de sondas) | A | 500 µL |
| Mezcla enzimática qRT-PCR | B | 100 µL |
| Tampón de dilución de plantillas PCR | C | 1 ml |
| qRT-PCR Primer Mix para H1N1 | D | 100 µL |
| Sonda para el subtipo H1N1 | E | 50 µL |
| ADN de control positivo (1×10⁸ copias/μL) | F | 50 µL |
| Reactivo de liberación de ARN (ensayo, método sin extracción) | G | 20 pruebas |
| Manual del usuario | H | 1 ejemplar |
Cómo funciona
El kit detecta el ARN viral mediante una reacción de PCR de transcripción inversa de un solo paso. Durante la amplificación, el La Taq polimerasa escinde la sonda doblemente marcadaEl resultado es una señal de fluorescencia proporcional a la cantidad de ARN diana presente.
La fluorescencia se mide durante cada ciclo, lo que permite control en tiempo real del proceso de PCR.
Principio de detección
Valor Ct (Umbral de ciclo): Número de ciclos de PCR necesarios para que la fluorescencia supere el umbral. Un Ct más bajo indica una mayor cantidad diana inicial.
Ajuste del umbral: Basado en una desviación estándar de 10× de la fluorescencia de los 3-15 ciclos iniciales (fondo).
Rendimiento y criterios de corte
| Tipo de resultado | Criterios |
|---|---|
| Positivo | Ct ≤ 35 con una curva de amplificación típica en forma de S. |
| Sospechoso Positivo | Ct 35-40 → Se recomienda repetir la prueba |
| Negativo | Ct ≥ 40 o sin Ct + sin curva de amplificación. |
Los controles positivos y negativos deben superar controles de calidad. Ct del control negativo ≥40 y del control positivo Ct ≤30 con amplificación exponencial.
Protocolo de reacción
Transcripción inversa + PCR (20 μL por reacción)
| Reactivo | Volumen |
|---|---|
| Tampón qRT-PCR | 10 μL |
| Mezcla de enzimas | 2 μL |
| Mezcla de imprimación | 2 μL |
| Sonda | 1 μL |
| Plantilla de ARN o control | 5 μL |
Volumen total: 20 μL
Condiciones de ciclado térmico:
| Paso | Temperatura | Tiempo |
|---|---|---|
| Transcripción inversa | 50°C | 30 min |
| Desnaturalización inicial | 94°C | 10 minutos |
| Ciclado PCR × 40 | ||
| - Desnaturalización | 94°C | 15 segundos |
| - Recocido/Extensión | 60°C | 1 min (FAM) |
Cuantificación (opcional)
Prepare un curva estándar utilizando diluciones seriadas 10 veces (10²-10⁷ copias/μL) del control de ADN sintético. Represente gráficamente los valores Ct frente al log(concentración) para interpolar los números de copias de ARN en muestras desconocidas.
Ventajas de la PCR basada en sondas sobre SYBR Green:
| Característica | Verde SYBR | Basado en sonda (este kit) |
|---|---|---|
| Especificidad | Se une a todos los dsADN | Se une sólo a una secuencia diana específica |
| Riesgo de falsos positivos | Más alto | Baja |
| Coste | Baja | Más alto (pero más fiable) |
| Facilidad de uso | Más sencillo | Requiere diseño de sonda |
Uso previsto
Este producto es sólo con fines de investigación. No está aprobado para diagnóstico clínico o procedimientos terapéuticos.






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