Набор для тестирования птичьего гриппа (вирус подтипа H1N1) для обнаружения методом ПЦР в реальном времени

Описание

Название продукта (EN): Птичий грипп Набор для тестирования
Размер упаковки: 50 тестов
Цена: Свяжитесь с нашим отделом продаж
Хранение: Транспортировать при низкой температуре; хранить при -20°Cдействителен в течение 12 месяцев
Доставка из: Шанхай, Китай
Только для исследовательских целей


Обзор набора для тестирования на птичий грипп

Этот набор для тестирования на птичий грипп специально разработан для качественное и количественное выявление РНК вируса гриппа А подтипа H1N1 используя Технология флуоресцентной qRT-PCR на основе зонда. Нацеливаясь на консервативные генетические регионы подтипа H1N1, набор обеспечивает высокую специфичность и чувствительность при выявлении вируса птичьего гриппа А из биологических и экологических образцов.

В отличие от ПЦР на основе красителя SYBR Green, эта Система на основе зондов TaqMan Используются меченные флуоресценцией зонды, которые излучают сигналы только при гибридизации и расщеплении в процессе амплификации, что обеспечивает высокая специфичность и более низкие показатели ложноположительных результатов.


Основные характеристики

Высокоспецифичный и чувствительный - Разработан на основе высококонсервативных областей генома H1N1; отсутствие перекрестной реакции с нецелевыми вирусами
Готовая к использованию система - Требуется только РНК-шаблон от пользователя
Оптимизированные праймеры и зонды - Обеспечивает эффективное усиление и обнаружение
Положительный контроль в комплекте - Синтетическая неинфекционная ДНК для проверки результатов
Количественные и качественные приложения - Подходит для исследований, наблюдения и скрининга
Совместимость с основными приборами для qPCR - Обнаружение флуоресценции на канале FAM


Содержание набора (50 тестов)

Описание компонентаКодОбъем и цвет колпачка
Буфер для qRT-PCR (система зондов)A500 мкл
Ферментная смесь для qRT-PCRB100 мкл
Буфер для разведения ПЦР-шаблоновC1 мл
Смесь праймеров для qRT-PCR для H1N1D100 мкл
Зонд для определения субтипа H1N1E50 мкл
ДНК положительного контроля (1×10⁸ копий/мкл)F50 мкл
Реагент для высвобождения РНК (пробный, безэкстракционный метод)G20 тестов
Руководство пользователяH1 экземпляр

Как это работает

Набор определяет вирусную РНК с помощью одноэтапной реакции ПЦР с обратной транскрипцией. Во время амплификации Taq-полимераза расщепляет зонд с двойной меткойотделяя флуорофор от тушителя, что приводит к появлению флуоресцентного сигнала, пропорционального количеству присутствующей целевой РНК.

Флуоресценция измеряется во время каждого цикла, что позволяет мониторинг в режиме реального времени процесса ПЦР.


Принцип обнаружения

  • Значение Ct (порог цикла): Количество циклов ПЦР, необходимое для того, чтобы флуоресценция превысила пороговое значение. Более низкий Ct указывает на более высокое исходное количество мишени.

  • Установка порога: На основе 10-кратного стандартного отклонения флуоресценции от первых 3-15 циклов (фон).


Критерии эффективности и отсечения

Тип результатаКритерии
ПозитивCt ≤ 35 с типичной S-образной кривой амплификации
Подозреваемый ПоложительныйCt 35-40 → Рекомендуется повторный тест
НегативCt ≥ 40 или отсутствие Ct + отсутствие кривой амплификации

Положительный и отрицательный контроль должны пройти проверку качества. Ct отрицательного контроля ≥40, а Ct положительного контроля ≤30 при экспоненциальной амплификации.


Протокол реакции

Обратная транскрипция + ПЦР (20 мкл на реакцию)

РеагентОбъем
Буфер для qRT-PCR10 мкл
Смесь ферментов2 мкл
Грунтовочная смесь2 мкл
Зонд1 мкл
Шаблон РНК или контроль5 мкл
  • Общий объем: 20 мкл

  • Условия термоциклирования:

ШагТемператураВремя
Обратная транскрипция50°C30 мин
Начальная денатурация94°C10 мин
Циклирование ПЦР × 40
- Денатурация94°C15 сек
- Отжиг/расширение60°C1 мин (FAM)

Количественная оценка (необязательно)

Подготовьте стандартная кривая с использованием серийных 10-кратных разведений (10²-10⁷ копий/мкл) синтетической ДНК-контроля. Для интерполяции числа копий РНК в неизвестных образцах отложите значения Ct от log(концентрация).


Преимущества ПЦР на основе зондов перед SYBR Green:

ХарактеристикаSYBR GreenНа основе зонда (этот набор)
СпецифичностьСвязывает все дсДНКСвязывается только с определенной последовательностью-мишенью
Риск ложных срабатыванийВышеНижний
СтоимостьНижнийБолее высокая (но более надежная)
Простота использованияПрощеТребуется конструкция зонда

Предполагаемое использование

Этот продукт только для исследовательских целей. Он не одобрен для клиническая диагностика или терапевтические процедуры.

Отзывы

Отзывов пока нет.

Будьте первым, кто оставил отзыв на “Avian Influenza Test Kit (H1N1 Subtype Virus) Real-Time PCR Detection Kit”

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

ru_RURussian