Набор для тестирования птичьего гриппа (вирус подтипа H1N1) для обнаружения методом ПЦР в реальном времени
Описание
Название продукта (EN): Птичий грипп Набор для тестирования
Размер упаковки: 50 тестов
Цена: Свяжитесь с нашим отделом продаж
Хранение: Транспортировать при низкой температуре; хранить при -20°Cдействителен в течение 12 месяцев
Доставка из: Шанхай, Китай
Только для исследовательских целей
Обзор набора для тестирования на птичий грипп
Этот набор для тестирования на птичий грипп специально разработан для качественное и количественное выявление РНК вируса гриппа А подтипа H1N1 используя Технология флуоресцентной qRT-PCR на основе зонда. Нацеливаясь на консервативные генетические регионы подтипа H1N1, набор обеспечивает высокую специфичность и чувствительность при выявлении вируса птичьего гриппа А из биологических и экологических образцов.
В отличие от ПЦР на основе красителя SYBR Green, эта Система на основе зондов TaqMan Используются меченные флуоресценцией зонды, которые излучают сигналы только при гибридизации и расщеплении в процессе амплификации, что обеспечивает высокая специфичность и более низкие показатели ложноположительных результатов.
Основные характеристики
✅ Высокоспецифичный и чувствительный - Разработан на основе высококонсервативных областей генома H1N1; отсутствие перекрестной реакции с нецелевыми вирусами
✅ Готовая к использованию система - Требуется только РНК-шаблон от пользователя
✅ Оптимизированные праймеры и зонды - Обеспечивает эффективное усиление и обнаружение
✅ Положительный контроль в комплекте - Синтетическая неинфекционная ДНК для проверки результатов
✅ Количественные и качественные приложения - Подходит для исследований, наблюдения и скрининга
✅ Совместимость с основными приборами для qPCR - Обнаружение флуоресценции на канале FAM
Содержание набора (50 тестов)
| Описание компонента | Код | Объем и цвет колпачка |
|---|---|---|
| Буфер для qRT-PCR (система зондов) | A | 500 мкл |
| Ферментная смесь для qRT-PCR | B | 100 мкл |
| Буфер для разведения ПЦР-шаблонов | C | 1 мл |
| Смесь праймеров для qRT-PCR для H1N1 | D | 100 мкл |
| Зонд для определения субтипа H1N1 | E | 50 мкл |
| ДНК положительного контроля (1×10⁸ копий/мкл) | F | 50 мкл |
| Реагент для высвобождения РНК (пробный, безэкстракционный метод) | G | 20 тестов |
| Руководство пользователя | H | 1 экземпляр |
Как это работает
Набор определяет вирусную РНК с помощью одноэтапной реакции ПЦР с обратной транскрипцией. Во время амплификации Taq-полимераза расщепляет зонд с двойной меткойотделяя флуорофор от тушителя, что приводит к появлению флуоресцентного сигнала, пропорционального количеству присутствующей целевой РНК.
Флуоресценция измеряется во время каждого цикла, что позволяет мониторинг в режиме реального времени процесса ПЦР.
Принцип обнаружения
Значение Ct (порог цикла): Количество циклов ПЦР, необходимое для того, чтобы флуоресценция превысила пороговое значение. Более низкий Ct указывает на более высокое исходное количество мишени.
Установка порога: На основе 10-кратного стандартного отклонения флуоресценции от первых 3-15 циклов (фон).
Критерии эффективности и отсечения
| Тип результата | Критерии |
|---|---|
| Позитив | Ct ≤ 35 с типичной S-образной кривой амплификации |
| Подозреваемый Положительный | Ct 35-40 → Рекомендуется повторный тест |
| Негатив | Ct ≥ 40 или отсутствие Ct + отсутствие кривой амплификации |
Положительный и отрицательный контроль должны пройти проверку качества. Ct отрицательного контроля ≥40, а Ct положительного контроля ≤30 при экспоненциальной амплификации.
Протокол реакции
Обратная транскрипция + ПЦР (20 мкл на реакцию)
| Реагент | Объем |
|---|---|
| Буфер для qRT-PCR | 10 мкл |
| Смесь ферментов | 2 мкл |
| Грунтовочная смесь | 2 мкл |
| Зонд | 1 мкл |
| Шаблон РНК или контроль | 5 мкл |
Общий объем: 20 мкл
Условия термоциклирования:
| Шаг | Температура | Время |
|---|---|---|
| Обратная транскрипция | 50°C | 30 мин |
| Начальная денатурация | 94°C | 10 мин |
| Циклирование ПЦР × 40 | ||
| - Денатурация | 94°C | 15 сек |
| - Отжиг/расширение | 60°C | 1 мин (FAM) |
Количественная оценка (необязательно)
Подготовьте стандартная кривая с использованием серийных 10-кратных разведений (10²-10⁷ копий/мкл) синтетической ДНК-контроля. Для интерполяции числа копий РНК в неизвестных образцах отложите значения Ct от log(концентрация).
Преимущества ПЦР на основе зондов перед SYBR Green:
| Характеристика | SYBR Green | На основе зонда (этот набор) |
|---|---|---|
| Специфичность | Связывает все дсДНК | Связывается только с определенной последовательностью-мишенью |
| Риск ложных срабатываний | Выше | Нижний |
| Стоимость | Нижний | Более высокая (но более надежная) |
| Простота использования | Проще | Требуется конструкция зонда |
Предполагаемое использование
Этот продукт только для исследовательских целей. Он не одобрен для клиническая диагностика или терапевтические процедуры.






Отзывы
Отзывов пока нет.