Kit di estrazione del DNA/RNA totale (metodo della colonna di centrifugazione) per il test del virus degli uccelli

Descrizione

Numero di catalogo: DP201-01 / DP201-02
Specifiche tecniche: 25T / 50T
Immagazzinamento: Temperatura ambiente (15-25°C)

Descrizione del prodotto

Il Kit di estrazione del DNA/RNA totale è progettato per la purificazione rapida ed efficiente di acidi nucleici totali di alta qualità, compresi DNA/RNA virali, batterici e parassitari, da una varietà di campioni biologici come tessuti, sangue, secrezioni ed escrementi.

Utilizzando tecnologia delle colonne di spin a membrana di silice, Il kit consente un'estrazione affidabile degli acidi nucleici senza dover ricorrere al fenolo-cloroformio tossico o alla precipitazione in alcol che richiede molto tempo. Gli acidi nucleici purificati sono adatti a un'ampia gamma di applicazioni a valle, tra cui PCR, RT-PCR, LAMP/RT-LAMP, e Blotting Sud/Nord.

Principio del metodo

In condizioni di elevata salinità, gli acidi nucleici si legano selettivamente alla membrana di silice della colonna di spin, mentre le proteine e le impurità vengono lavate via. Dopo diversi passaggi di lavaggio, il DNA/RNA di elevata purezza viene eluito con acqua trattata con DEPC, pronto per l'uso immediato nei flussi di lavoro di biologia molecolare.

Contenuto del kit

⚠️ Nota: Aggiungi 20 mL (per 25T) o 40 mL (per 50T) di etanolo assoluto al tampone di lavaggio prima del primo utilizzo.

Tipi di campioni e preparazione

• Sangue: Centrifugare >500 µL di sangue anticoagulato con EDTA, trasferire 200 µL di plasma per l'estrazione.

• Tessuto: Omogeneizzare 0,05-1 g di tessuto in soluzione fisiologica (volume 5-10×), prelevare 200 µL di omogenato per l'elaborazione.

• Campioni di tampone/fecali: Tamponare l'area di raccolta dopo averla inumidita con soluzione fisiologica. Staccare la punta del tampone in una provetta di soluzione fisiologica da 1 mL, agitare per 30 secondi, quindi trasferire 200 µL.

Protocollo semplificato del kit di estrazione

1. Miscelare 200 µL di campione con 500 µL di tampone di lisi → incubare 5 min → centrifugare.

2. Trasferire 400 µL di surnatante + 200 µL di etanolo → agitare.

3. Caricare sulla colonna di centrifugazione A (nella provetta di raccolta B) → centrifugare 1 min.

4. Scartare il flowthrough → aggiungere 600 µL di tampone di lavaggio → centrifugare 1 min.

5. Ripetere la centrifugazione per asciugare la colonna → trasferire la colonna A in una nuova provetta.

6. Aggiungere 50 µL di tampone di eluizione → incubare 1-2 min → centrifugare → raccogliere gli acidi nucleici.

⏱️ Tempo totale: ~20-30 minuti
🧊 Conservazione degli acidi nucleici purificati: Conservare a -80°C se non utilizzato immediatamente.

Precauzioni

• Solo per uso singolo; non riutilizzare le colonne di centrifugazione o le provette di raccolta.

• Indossare guanti, camice e maschera durante l'operazione. Evitare di toccare i bordi delle provette e le aperture delle colonne.

• Disinfettare le superfici di lavoro e le attrezzature dopo l'uso con 1% ipoclorito di sodio o 75% etanolo.

• Smaltire i rifiuti biologici in conformità alle norme di sicurezza.

Applicazioni di questo kit di estrazione del DNA/RNA totale

• Estrazione di acidi nucleici virali e batterici

• Preparazione dei campioni diagnostici aviari

• PCR, RT-PCR e amplificazione isotermica

• Laboratori di diagnostica veterinaria e di ricerca

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