살모넬라 UNG 핵산 검출 키트(실시간 PCR 50T/100T)

설명

카탈로그 번호: AP2409004
사양: 50회 테스트 / 100회 테스트
저장소: -20°C

제품 설명

그리고 살모넬라 핵산 검출 키트 는 실시간 PCR 의 신속하고 특이적이며 민감한 검출을 위해 설계된 분석법입니다. 살모넬라 DNA 대변, 물, 티슈, 음식 등 다양한 유형의 시료에서 검출할 수 있습니다. 살모넬라균은 오염된 달걀, 가금류, 육류를 통해 주로 전염되는 주요 식품 매개 병원체입니다.

이 키트는 다음을 사용합니다. 형광 프로브 기반 정량 PCR(qPCR) 기술을 사용하여 살모넬라 게놈의 특정 단편을 증폭합니다. 결과는 Ct(주기 역치) 값 또는 표준 곡선 정량화를 통해 샘플의 박테리아 부하를 추정하여 결정됩니다.

주요 기능

• ✅ 높은 특이도 및 감도 TaqMan 형광 프로브 방법 사용

• ✅ 여러 실시간 PCR 시스템(FAM 채널)과 호환 가능

• ✅ 결과 검증을 위한 양성 및 음성 대조군 포함

• ✅ 캐리오버 오염을 제거하기 위해 UNG 효소가 함유되어 있습니다.

• ✅ 식품 안전 모니터링, 동물 질병 진단 및 연구에 적합

키트 구성 요소

샘플 유형 및 준비

• 면봉(구강/설사): 조류 및 가금류의 경우 멸균 면봉을 목구멍과 배설물에 넣고 부드럽게 돌린 다음 멸균 원심분리기 튜브로 옮깁니다.

• 전혈: 사용 EDTA 항응고제만. 헤파린을 사용하지 마십시오. 신선한 혈액을 사용하는 것이 좋습니다. 2-8°C에서 최대 7일간 보관하거나 -20°C에서 최대 3개월간 보관하세요.

• 조직 샘플: 간 또는 기타 조직 ≤100mg을 사용하고, 200-500μL 멸균수로 균질화합니다.

참고: 다음을 기준으로 사전 농축이 필요합니다. GB 4789.4-2016 표준 또는 이와 동등한 표준. BPW 원액(1:10 w/v)으로 농축한 후 36±1°C에서 8~18시간 배양할 것을 권장합니다.

다음을 사용하세요. DN/RNA 추출 키트(카탈로그 번호 DP201) 또는 이와 동등한 방법으로 핵산을 추출합니다. 추출한 DNA는 얼음에 보관하고 즉시 검사해야 합니다(4°C에서 7일 이내 또는 -20°C에서 6개월 이내).

PCR 프로토콜

1. 반응 믹스 준비:

   • 모든 시약을 실온에서 해동하고 간단히 원심분리합니다.

   • 살모넬라 PCR 혼합물 23μL를 각 PCR 튜브에 분배합니다.

   • 각 튜브에 각각 2μL의 샘플 DNA, 양성 대조군 또는 음성 대조군을 추가합니다.

   • 최종 볼륨: 반응당 25μL.

2. PCR 프로그램:

   • UNG 처리: 50°C에서 2분간

   • 초기 변성: 95°C에서 5분간 95°C

   • 40주기:

     • 변성: 95°C에서 10초간

     • 어닐링/신장: 60°C에서 35초간(FAM 신호 수집)

3. 형광 채널:

   • FAM(ABI 시리즈 및 기타 qPCR 기기용)

   • 기기에 필요한 경우 ROX 기준 염료를 추가합니다.

결과 해석

참고: 의심스러운 결과는 억제제(예: 알코올, 항응고제) 또는 낮은 DNA 수율로 인해 발생할 수 있습니다. 에어로졸 오염이 배제되고 재검사 시 Ct가 35 미만인 경우, 결과는 양성으로 간주됩니다.

품질 관리 기준

• 포지티브 제어: S자형 증폭 곡선이 있는 FAM Ct <28

• 네거티브 컨트롤: S-커브가 없는 Ct 또는 Ct ≥40 없음

• 그렇지 않으면 결과가 유효하지 않은 것으로 간주되어 재시험이 필요합니다.

주의 사항

1. 구역화된 워크플로: 프리-PCR, 시약 설정, 증폭 구역은 물리적 분리를 사용합니다. 보호 장비를 착용하고 구역 간에 장갑을 갈아 끼세요.

2. 오염 방지: 에어로졸 생성을 피하기 위해 PCR 후 튜브 개봉을 지연시킵니다. 장비의 자외선 또는 화학적 멸균을 강력히 권장합니다.

3. 동결/해동 주기: 시약을 반복해서 얼렸다 녹이지 마세요. 사용하기 전에 완전히 해동하고 부드럽게 혼합하세요.

4. 연구용으로만 사용하세요: 이 키트의 대상은 다음과 같습니다. 과학 연구 식품/환경 안전 검사 전용입니다. 임상 진단용이 아닙니다.

보관 및 유통기한

• 저장 위치 -20°C

• 최소 다음 기간 동안 유효합니다. 12개월 개봉하지 않고 올바르게 보관한 경우

• 빛과 반복되는 동결-해동 주기로부터 보호