沙門氏菌 UNG 核酸檢測試劑盒（Real-Time PCR 50T/100T）

描述

目錄編號： AP2409004
規格： 50 測試 / 100 測試
儲存： -20°C

產品說明

的 沙門氏菌核酸檢測試劑盒 是即時 PCR 專為快速、特異且靈敏地檢測 沙門氏菌 DNA 在多種樣本類型中，包括糞便、水、組織和食物。沙門氏菌是一種主要的食源性病原菌，通常經由受污染的蛋、家禽和肉類傳播。

本套件使用 以螢光探針為基礎的定量 PCR (qPCR) 技術來擴增沙門氏菌基因組的特定片段。結果由 Ct（週期臨界值）值決定，或透過標準曲線定量來估計樣本中的細菌數量。

主要功能

• ✅ 高特異性和高靈敏度 使用 TaqMan 螢光探針方法

• 與多種即時 PCR 系統相容 (FAM 通道)

• ✅ 包括陽性和陰性對照，用於結果驗證

• ✅ 含有 UNG 酵素，可消除攜帶污染

• ✅ 適用於食品安全監控、動物疾病診斷和研究

套件組件

樣品類型與製備

• 拭子（口腔/陰道）:對於鳥類和家禽，將無菌棉花棒插入喉嚨和泄殖腔，輕輕轉動，然後轉入無菌離心管中。

• 全血:使用 僅 EDTA 抗凝劑.請勿使用肝素。建議使用新鮮血液。儲存於 2-8°C 可達 7 天，或儲存於 -20°C 可達 3 個月。

• 組織樣本:使用 ≤100 mg 的肝臟或其他組織，用 200-500 μL 無菌水均質化。

請注意： 需要根據以下條件進行預先增補 GB 4789.4-2016 標準或同等標準。建議在 BPW 肉湯（1:10 w/v）中濃縮，然後在 36 ± 1°C 下培養 8-18 小時。

請使用 DN/RNA 抽提套件 (Cat. No. DP201) 或同等方法提取核酸。萃取的 DNA 應置於冰上，並立即進行測試（4°C 下 ≤7 天或 -20°C 下 ≤6 個月）。

PCR 協定

1. 反應混合物製備：

   • 在室溫下解凍所有試劑，並簡單離心。

   • 將 23 μL 的沙門氏菌 PCR 混合物分送至每個 PCR 管中。

   • 在每個試管中分別加入 2 μL 樣品 DNA、陽性對照或陰性對照。

   • 最終卷： 每個反應 25 μL.

2. PCR 程式：

   • UNG 處理：50°C 2 分鐘

   • 初始變性： 95°C 5 分鐘

   • 40 循環：

     • 變性：95°C 10 秒

     • 退火/延長：60°C 35 秒（收集 FAM 訊號）

3. 螢光通道：

   • FAM (適用於 ABI 系列及其他 qPCR 儀器)

   • 若儀器需要，加入 ROX 參考染料。

結果詮釋

注意：可疑結果可能由抑制劑（如酒精、抗凝劑）或 DNA 產量低引起。如果排除了氣溶膠污染，且再次檢測時 Ct <35，則該結果被視為陽性。

品質控制標準

• 陽性對照： FAM Ct <28，擴增曲線呈 S 型

• 陰性對照： 無 Ct 或 Ct ≥40 且無 S 型曲線

• 否則，結果視為無效，需要重新測試。

預防措施

1. 分區工作流程： 在預PCR、試劑設定和擴大區域使用物理分隔。穿戴防護裝備，並在不同區域之間更換手套。

2. 避免污染： 延遲 PCR 後的試管開啟時間，以避免產生噴霧。強烈建議對設備進行紫外線或化學消毒。

3. 凍融循環： 避免重複凍融試劑。使用前請完全解凍並輕輕混和。

4. 僅供研究使用： 本套件適用於 科學研究 僅適用於食品/環境安全篩檢。不可用於臨床診斷。

儲存與保存期限

• 儲存於 -20°C

• 有效期至少 12 個月 如果未開封並妥善保存

• 防止光線照射和反覆凍融循環