Набор для обнаружения нуклеиновых кислот Salmonella UNG (ПЦР в реальном времени 50T/100T)

Описание

Номер по каталогу: AP2409004
Технические характеристики: 50 тестов / 100 тестов
Хранение: -20°C

Описание товара

Сайт Набор для обнаружения нуклеиновых кислот сальмонеллы в режиме реального времени ПЦР анализ, предназначенный для быстрого, специфического и чувствительного обнаружения ДНК сальмонеллы в различных типах образцов, включая стул, воду, ткани и продукты питания. Сальмонелла - один из основных возбудителей пищевых инфекций, обычно передающихся через зараженные яйца, птицу и мясо.

В этом наборе используется Количественная ПЦР на основе флуоресцентных зондов (qPCR) Технология амплификации специфического фрагмента генома Salmonella. Результаты определяются по значениям Ct (порог цикла) или с помощью стандартной кривой количественного анализа для оценки бактериальной нагрузки в образце.

Основные характеристики

• ✅ Высокая специфичность и чувствительность методом флуоресцентного зонда TaqMan

• ✅ Совместимость с несколькими системами ПЦР в реальном времени (канал FAM)

• ✅ Включает положительный и отрицательный контроль для подтверждения результатов

• ✅ Фермент UNG включен в состав для устранения переноса загрязнений

• ✅ Подходит для мониторинга безопасности пищевых продуктов, диагностики болезней животных и научных исследований

Компоненты набора

Типы образцов и их подготовка

• Мазки (оральные/клоакальные): Для птиц и домашней птицы введите стерильный тампон в горло и клоаку, осторожно поверните, затем перенесите в стерильную центрифужную пробирку.

• Цельная кровь: Используйте Только антикоагулянт ЭДТА. Не используйте гепарин. Рекомендуется использовать свежую кровь. Хранить при температуре 2-8°C до 7 дней или при температуре -20°C до 3 месяцев.

• Образцы тканей: Используйте ≤100 мг печени или других тканей, гомогенизируйте в 200-500 мкл стерильной воды.

Примечание: Предварительное обогащение требуется в зависимости от GB 4789.4-2016 стандарты или эквивалент. Предлагается обогащение в бульоне BPW (1:10 w/v) с последующей инкубацией при 36 ± 1°C в течение 8-18 часов.

Пожалуйста, используйте Набор для выделения ДНК/РНК (кат. № DP201) или эквивалентный метод выделения нуклеиновых кислот. Выделенную ДНК следует хранить на льду и тестировать в кратчайшие сроки (≤7 дней при 4°C или ≤6 месяцев при -20°C).

Протокол ПЦР

1. Приготовление реакционной смеси:

   • Разморозьте все реагенты при комнатной температуре и коротко отцентрифугируйте.

   • Дозируйте 23 мкл смеси для ПЦР Salmonella в каждую пробирку для ПЦР.

   • Добавьте по 2 мкл ДНК образца, положительного контроля или отрицательного контроля в каждую пробирку соответственно.

   • Последний том: 25 мкл на реакцию.

2. Программа PCR:

   • Обработка UNG: 50°C в течение 2 минут

   • Начальная денатурация: 95°C в течение 5 минут

   • 40 циклов:

     • Денатурация: 95°C в течение 10 секунд

     • Отжиг/удлинение: 60°C в течение 35 секунд (сигнал FAM собран)

3. Канал флуоресценции:

   • FAM (для серии ABI и других приборов для qPCR)

   • Добавьте эталонный краситель ROX, если это требуется прибором.

Интерпретация результатов

Примечание: Подозрительные результаты могут быть вызваны ингибиторами (например, спиртом, антикоагулянтами) или низким выходом ДНК. Если аэрозольное загрязнение исключено и Ct <35 при повторном анализе, результат считается положительным.

Критерии контроля качества

• Положительный контроль: FAM Ct <28 с S-образной кривой амплификации

• Отрицательный контроль: Отсутствие Ct или Ct ≥40 без S-кривой

• В противном случае результаты считаются недействительными и требуется повторное тестирование.

Меры предосторожности

1. Зонированный рабочий процесс: Используйте физическое разделение для зон пре-ПЦР, настройки реагентов и амплификации. Надевайте защитные средства и меняйте перчатки между зонами.

2. Избегайте загрязнения: Во избежание образования аэрозоля отложите открытие пробирок после проведения ПЦР. Настоятельно рекомендуется ультрафиолетовая или химическая стерилизация оборудования.

3. Циклы замораживания/оттаивания: Избегайте повторного замораживания-размораживания реагентов. Перед использованием полностью оттаивайте и аккуратно перемешивайте.

4. Только для научных целей: Этот набор предназначен для научные исследования Только для проверки безопасности пищевых продуктов и окружающей среды. Не для клинической диагностики.

Хранение и срок годности

• Хранить в -20°C

• Действителен в течение как минимум 12 месяцев если не вскрывать и хранить должным образом

• Защищать от света и повторяющихся циклов замораживания-размораживания