Kit de extração de DNA/RNA total (método de coluna de rotação) para teste de vírus de aves

Descrição

Número de catálogo: DP201-01 / DP201-02
Especificações: 25T / 50T
Armazenamento: Temperatura ambiente (15-25°C)

Descrição do produto

O Kit de extração de DNA/RNA total foi projetado para a purificação rápida e eficiente de ácidos nucleicos totais de alta qualidade, incluindo DNA/RNA viral, bacteriano e parasitário, de uma variedade de amostras biológicas, como tecidos, sangue, secreções e excretas.

Utilização de Tecnologia de coluna de spin com membrana de sílicaO kit permite a extração confiável de ácido nucleico sem a necessidade de fenol-clorofórmio tóxico ou precipitação de álcool demorada. Os ácidos nucleicos purificados são adequados para uma ampla gama de aplicações downstream, incluindo PCR, RT-PCR, LAMP/RT-LAMPe Southern/Northern blotting.

Princípio do método

Sob condições de alto teor de sal, os ácidos nucleicos se ligam seletivamente à membrana de sílica na coluna de spin, enquanto as proteínas e as impurezas são lavadas. Após várias etapas de lavagem, o DNA/RNA de alta pureza é eluído com água tratada com DEPC, pronto para uso imediato em fluxos de trabalho de biologia molecular.

Conteúdo do kit

⚠️ Observação: Adicionar 20 mL (para 25T) ou 40 mL (para 50T) de etanol absoluto ao tampão de lavagem antes do primeiro uso.

Tipos e preparação de amostras

• Sangue: Centrifugue >500 µL de sangue anticoagulado com EDTA e transfira 200 µL de plasma para extração.

• Tecido: Homogeneize 0,05-1 g de tecido em solução salina (5-10× volume), pegue 200 µL de homogenato para processamento.

• Amostras de esfregaço/fecal: Faça um esfregaço na área de coleta após umedecê-la em solução salina. Retire a ponta do swab em um tubo de 1 mL de solução salina, agite em vórtex por 30 segundos e, em seguida, transfira 200 µL.

Protocolo simplificado do kit de extração

1. Misture 200 µL de amostra com 500 µL de tampão de lise → incube por 5 minutos → centrifugue.

2. Transfira 400 µL de sobrenadante + 200 µL de etanol → vortex.

3. Carregue na coluna de centrifugação A (no tubo de coleta B) → centrifugue por 1 minuto.

4. Descarte o fluxo → adicione 600 µL de tampão de lavagem → centrifugue por 1 minuto.

5. Repita a centrifugação para secar a coluna → transfira a coluna A para um novo tubo.

6. Adicione 50 µL de tampão de eluição → incube por 1-2 minutos → centrifugue → colete os ácidos nucleicos.

⏱️ Tempo total: ~20-30 minutos
🧊 Armazenamento de ácidos nucleicos purificados: Armazene a -80°C se não for usado imediatamente.

Precauções

• Apenas para uso único; não reutilize colunas de centrifugação ou tubos de coleta.

• Use luvas, jaleco e máscara durante a operação. Evite tocar nas bordas dos tubos e nas aberturas das colunas.

• Desinfete as superfícies de trabalho e os equipamentos após o uso com hipoclorito de sódio 1% ou etanol 75%.

• Descarte os resíduos biológicos de acordo com as normas de segurança.

Aplicações do kit de extração de DNA/RNA total

• Extração de ácido nucleico viral e bacteriano

• Preparação de amostras para diagnóstico aviário

• PCR, RT-PCR e amplificação isotérmica

• Laboratórios de pesquisa e diagnóstico veterinário

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