Kit de teste para influenza aviária (vírus do subtipo H1N1) Kit de detecção de PCR em tempo real
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Nome do produto (EN): Influenza Aviária Kit de teste
Tamanho da embalagem: 50 testes
Preço: Entre em contato com nossas vendas
Armazenamento: Transporte em baixa temperatura; armazene em -20°C, válido por 12 meses
Frete de: Xangai, China
Apenas para uso em pesquisa
Visão geral do kit de teste para influenza aviária
Esse kit de teste para influenza aviária foi projetado especificamente para detecção qualitativa e quantitativa do RNA do subtipo H1N1 do vírus da gripe A usando tecnologia qRT-PCR fluorescente baseada em sonda. Ao visar regiões genéticas conservadas do subtipo H1N1, o kit oferece alta especificidade e sensibilidade na detecção do vírus da influenza A aviária em amostras biológicas e ambientais.
Ao contrário da PCR baseada em corante SYBR Green, essa Sistema baseado em sonda TaqMan utiliza sondas marcadas com fluorescência que emitem sinais somente após a hibridização e a clivagem durante a amplificação, garantindo especificidade superior e menores taxas de falso-positivo.
Principais recursos
✅ Altamente específico e sensível - Projetado com base em regiões altamente conservadas do genoma do H1N1; sem reação cruzada com vírus não visados
✅ Sistema pronto para uso - Requer apenas o modelo de RNA do usuário
✅ Primers e sondas otimizados - Garante amplificação e detecção eficientes
✅ Controle positivo incluído - DNA sintético não infeccioso para validação de resultados
✅ Aplicações quantitativas e qualitativas - Adequado para uso em pesquisa, vigilância e triagem
✅ Compatível com os principais instrumentos de qPCR - Detecção de fluorescência no canal FAM
Conteúdo do kit (50 testes)
| Descrição do componente | Código | Volume e cor da tampa |
|---|---|---|
| Tampão de qRT-PCR (sistema de sonda) | A | 500 µL |
| Mistura de enzimas para qRT-PCR | B | 100 µL |
| Tampão de diluição do modelo de PCR | C | 1 mL |
| Mistura de primers qRT-PCR para H1N1 | D | 100 µL |
| Sonda para o subtipo H1N1 | E | 50 µL |
| DNA de controle positivo (1 × 10⁸ cópias/μL) | F | 50 µL |
| Reagente de liberação de RNA (teste, método sem extração) | G | 20 testes |
| Manual do usuário | H | 1 cópia |
Como funciona
O kit detecta o RNA viral por meio de uma reação de PCR de transcrição reversa em uma etapa. Durante a amplificação, o A Taq polimerase cliva a sonda com marcação duplaseparando o fluoróforo do supressor, o que resulta em um sinal de fluorescência proporcional à quantidade de RNA alvo presente.
A fluorescência é medida durante cada ciclo, permitindo monitoramento em tempo real do processo de PCR.
Princípio de detecção
Valor Ct (Limite de ciclo): O número de ciclos de PCR necessários para que a fluorescência ultrapasse o limite. Ct mais baixo indica uma quantidade alvo inicial mais alta.
Configuração do limite: Com base no desvio padrão de 10× da fluorescência dos 3-15 ciclos iniciais (background).
Critérios de desempenho e de corte
| Tipo de resultado | Critérios |
|---|---|
| Positivo | Ct ≤ 35 com uma curva de amplificação típica em forma de S |
| Suspeita positiva | Ct 35-40 → Recomenda-se repetir o teste |
| Negativo | Ct ≥ 40 ou sem Ct + sem curva de amplificação |
Os controles positivo e negativo devem passar por verificações de qualidade. Ct do controle negativo ≥40 e Ct do controle positivo ≤30 com amplificação exponencial.
Protocolo de reação
Transcrição reversa + PCR (20 μL por reação)
| Reagente | Volume |
|---|---|
| Tampão de qRT-PCR | 10 μL |
| Mistura de enzimas | 2 μL |
| Mistura de primers | 2 μL |
| Sonda | 1 μL |
| Modelo de RNA ou controle | 5 μL |
Volume total: 20 μL
Condições de ciclo térmico:
| Etapa | Temperatura | Tempo |
|---|---|---|
| Transcrição reversa | 50°C | 30 min |
| Desnaturação inicial | 94°C | 10 min |
| Ciclo de PCR × 40 | ||
| - Desnaturação | 94°C | 15 segundos |
| - Recozimento/extensão | 60°C | 1 min (FAM) |
Quantificação (opcional)
Prepare um curva padrão usando diluições seriadas de 10 vezes (10²-10⁷ cópias/μL) do controle de DNA sintético. Trace os valores de Ct em relação ao log (concentração) para interpolar os números de cópias de RNA em amostras desconhecidas.
Vantagens da PCR baseada em sonda em relação ao SYBR Green:
| Recurso | Verde SYBR | Baseado em sonda (este kit) |
|---|---|---|
| Especificidade | Liga-se a todos os dsDNA | Liga-se somente a uma sequência-alvo específica |
| Risco de falsos positivos | Mais alto | Inferior |
| Custo | Inferior | Mais alto (mas mais confiável) |
| Facilidade de uso | Mais simples | Requer o design da sonda |
Uso pretendido
Este produto é apenas para fins de pesquisa. Não é aprovado para diagnósticos clínicos ou procedimentos terapêuticos.





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