Test dell'acido nucleico del virus della malattia del becco e delle piume dei pappagalli PBFDV Kit

Descrizione

(Rilevamento del virus della malattia del becco e delle penne delle psittacine)
Numeri di catalogo: AP2304002-01 (24 test) / AP2304002-02 (48 test)

Panoramica del prodotto

Questo kit di diagnostica molecolare è stato sviluppato appositamente per il rilevamento di Virus della malattia del becco e delle penne delle psittacine (PBFDV) in un'ampia gamma di campioni aviari, tra cui piume, sangue, tessuti, tamponi orali e cloacali. Il kit utilizza fluorescenza in tempo reale PCR (qPCR) per amplificare e rilevare la regione genetica altamente conservata del PBFDV, garantendo un'elevata specificità e sensibilità.

Incorporato con un gene di riferimento interno endogenoIl kit monitora sia il processo di estrazione dell'acido nucleico che la qualità dell'amplificazione PCR, riducendo efficacemente i falsi negativi e migliorando l'affidabilità complessiva dei risultati.

Caratteristiche principali

• ✅ Alta sensibilità e specificità
  Rileva le regioni genetiche conservate del PBFDV con la PCR in tempo reale.

• ✅ Controllo interno incorporato
  Assicura la qualità del campione e l'integrità dell'estrazione.

• ✅ Compatibilità multi-campione
  Applicabile a piume, sangue conservato in EDTA, tessuti molli e tamponi.

• ✅ Risultati rapidi e precisi
  Risultati in 90-120 minuti con chiara interpretazione del valore Ct.

Componenti del kit

Immagazzinamento: Negozio presso -20°CDurata di conservazione ≥ 12 mesi.

Requisiti dei campioni

• Piume: Almeno 5 piume fresche (con fusto) dal petto, dall'addome o dalla gamba. Fare non utilizzare le piume che si liberano naturalmente.

• Sangue: Conservato in EDTA; conservare a 2-8°C (≤7 giorni) o -20°C (≤3 mesi). Evitare l'eparina e i cicli ripetuti di congelamento e scongelamento.

• Tessuto≤100 mg di organi molli o tessuti muscolari (senza pelle/fascia); omogeneizzare in acqua sterile.

• Estrazione del DNA: Utilizzare un kit convalidato come Kit di estrazione rapida del DNA genomico animale Three Lions Biotech (DP202).

Riepilogo del flusso di lavoro

1. Elaborazione dei campioni

   • Estrarre gli acidi nucleici secondo i protocolli standard del kit.

   • Conservare il DNA in ghiaccio durante la preparazione e l'analisi.

2. Impostazione della reazione

   • Scongelare tutti i reagenti, centrifugare brevemente.

   • Aggiungere 2μL di DNA campione, controllo positivo o negativo, in 23μL di miscela di reazione (volume finale: 25μL).

   • Mescolare e centrifugare prima di caricare sulla macchina PCR.

3. Amplificazione PCR

   • Pre-denaturazione: 95°C per 3 min.

   • 35 Cicli di:

     • Denaturazione: 95°C per 10 secondi

     • Ricottura/estensione: 60°C per 40 sec.

     • Rilevazione della fluorescenza a 60°C

   • Canali: FAM (target PBFDV), VIC/HEX (controllo interno)

4. Interpretazione dei risultati

   • Test valido: Controllo positivo Ct < 30 con curva S; controllo negativo Ct ≥ 35 o nessuna curva.

   • Controllo interno (VIC): Ct ≤ 32 = campione valido.

   • Rilevamento PBFDV (FAM):

     • Ct ≤ 32: positivo

     • 32 < Ct < 35: Sospetto - ripetere il test

     • Ct ≥ 35 o nessuna curva: Negativo

Precauzioni

• Eseguire tutte le fasi in aree pulite designate per evitare la contaminazione incrociata.

• Indossare guanti e camici da laboratorio; utilizzare pipette separate per la pre e la post-PCR.

• Non aprire le provette PCR subito dopo la reazione; lasciarle raffreddare.

• I reagenti sono per solo per uso di ricerca. Non destinato alla diagnosi clinica.

Applicazioni

• Individuazione rapida del PBFDV nei pappagalli e in altri uccelli psittacini

• Adatto ad allevatori di uccelli, veterinari, laboratori di animali domestici e ricercatori di malattie aviarie

• Compatibile con la maggior parte dei sistemi qPCR tradizionali (ABI, Bio-Rad, Roche, ecc.).

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