Kit de teste para influenza aviária (vírus do subtipo H1N1) Kit de detecção de PCR em tempo real

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Nome do produto (EN): Influenza Aviária Kit de teste
Tamanho da embalagem: 50 testes
Preço: Entre em contato com nossas vendas
Armazenamento: Transporte em baixa temperatura; armazene em -20°C, válido por 12 meses
Frete de: Xangai, China
Apenas para uso em pesquisa


Visão geral do kit de teste para influenza aviária

Esse kit de teste para influenza aviária foi projetado especificamente para detecção qualitativa e quantitativa do RNA do subtipo H1N1 do vírus da gripe A usando tecnologia qRT-PCR fluorescente baseada em sonda. Ao visar regiões genéticas conservadas do subtipo H1N1, o kit oferece alta especificidade e sensibilidade na detecção do vírus da influenza A aviária em amostras biológicas e ambientais.

Ao contrário da PCR baseada em corante SYBR Green, essa Sistema baseado em sonda TaqMan utiliza sondas marcadas com fluorescência que emitem sinais somente após a hibridização e a clivagem durante a amplificação, garantindo especificidade superior e menores taxas de falso-positivo.


Principais recursos

Altamente específico e sensível - Projetado com base em regiões altamente conservadas do genoma do H1N1; sem reação cruzada com vírus não visados
Sistema pronto para uso - Requer apenas o modelo de RNA do usuário
Primers e sondas otimizados - Garante amplificação e detecção eficientes
Controle positivo incluído - DNA sintético não infeccioso para validação de resultados
Aplicações quantitativas e qualitativas - Adequado para uso em pesquisa, vigilância e triagem
Compatível com os principais instrumentos de qPCR - Detecção de fluorescência no canal FAM


Conteúdo do kit (50 testes)

Descrição do componenteCódigoVolume e cor da tampa
Tampão de qRT-PCR (sistema de sonda)A500 µL
Mistura de enzimas para qRT-PCRB100 µL
Tampão de diluição do modelo de PCRC1 mL
Mistura de primers qRT-PCR para H1N1D100 µL
Sonda para o subtipo H1N1E50 µL
DNA de controle positivo (1 × 10⁸ cópias/μL)F50 µL
Reagente de liberação de RNA (teste, método sem extração)G20 testes
Manual do usuárioH1 cópia

Como funciona

O kit detecta o RNA viral por meio de uma reação de PCR de transcrição reversa em uma etapa. Durante a amplificação, o A Taq polimerase cliva a sonda com marcação duplaseparando o fluoróforo do supressor, o que resulta em um sinal de fluorescência proporcional à quantidade de RNA alvo presente.

A fluorescência é medida durante cada ciclo, permitindo monitoramento em tempo real do processo de PCR.


Princípio de detecção

  • Valor Ct (Limite de ciclo): O número de ciclos de PCR necessários para que a fluorescência ultrapasse o limite. Ct mais baixo indica uma quantidade alvo inicial mais alta.

  • Configuração do limite: Com base no desvio padrão de 10× da fluorescência dos 3-15 ciclos iniciais (background).


Critérios de desempenho e de corte

Tipo de resultadoCritérios
PositivoCt ≤ 35 com uma curva de amplificação típica em forma de S
Suspeita positivaCt 35-40 → Recomenda-se repetir o teste
NegativoCt ≥ 40 ou sem Ct + sem curva de amplificação

Os controles positivo e negativo devem passar por verificações de qualidade. Ct do controle negativo ≥40 e Ct do controle positivo ≤30 com amplificação exponencial.


Protocolo de reação

Transcrição reversa + PCR (20 μL por reação)

ReagenteVolume
Tampão de qRT-PCR10 μL
Mistura de enzimas2 μL
Mistura de primers2 μL
Sonda1 μL
Modelo de RNA ou controle5 μL
  • Volume total: 20 μL

  • Condições de ciclo térmico:

EtapaTemperaturaTempo
Transcrição reversa50°C30 min
Desnaturação inicial94°C10 min
Ciclo de PCR × 40
- Desnaturação94°C15 segundos
- Recozimento/extensão60°C1 min (FAM)

Quantificação (opcional)

Prepare um curva padrão usando diluições seriadas de 10 vezes (10²-10⁷ cópias/μL) do controle de DNA sintético. Trace os valores de Ct em relação ao log (concentração) para interpolar os números de cópias de RNA em amostras desconhecidas.


Vantagens da PCR baseada em sonda em relação ao SYBR Green:

RecursoVerde SYBRBaseado em sonda (este kit)
EspecificidadeLiga-se a todos os dsDNALiga-se somente a uma sequência-alvo específica
Risco de falsos positivosMais altoInferior
CustoInferiorMais alto (mas mais confiável)
Facilidade de usoMais simplesRequer o design da sonda

Uso pretendido

Este produto é apenas para fins de pesquisa. Não é aprovado para diagnósticos clínicos ou procedimentos terapêuticos.

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