Testkit für Vogelgrippe (Virus des Subtyps H1N1) Real-Time PCR-Nachweiskit
Beschreibung
Produktname (EN): Aviäre Influenza Test-Kit
Packungsgröße: 50 Tests
Preis: Kontakt zu unserem Vertrieb
Lagerung: Transport bei niedriger Temperatur; Lagerung bei -20°C, gültig für 12 Monate
Versand von: Schanghai, China
Nur für Forschungszwecke
Vogelgrippe-Testkit Übersicht
Dieses Testkit für Vogelgrippe wurde speziell für den qualitativer und quantitativer Nachweis von Influenza-A-Virus H1N1-Subtyp-RNA mit sondenbasierte fluoreszierende qRT-PCR-Technologie. Durch die Ausrichtung auf konservierte genetische Regionen des H1N1-Subtyps bietet der Kit eine hohe Spezifität und Sensitivität beim Nachweis des Vogelgrippe-A-Virus in biologischen und Umweltproben.
Im Gegensatz zur PCR mit SYBR-Grün-Farbstoff ist diese Auf TaqMan-Sonden basierendes System verwendet fluoreszenzmarkierte Sonden, die nur bei der Hybridisierung und Spaltung während der Amplifikation Signale aussenden. höhere Spezifität und geringere falsch-positive Raten.
Wesentliche Merkmale
✅ Hochgradig spezifisch und empfindlich - Entwickelt auf der Grundlage hoch konservierter Regionen des H1N1-Genoms; keine Kreuzreaktion mit Nicht-Zielviren
✅ Gebrauchsfertiges System - Benötigt nur eine RNA-Vorlage vom Benutzer
✅ Optimierte Primer und Sonden - Sorgt für effiziente Amplifikation und Detektion
✅ Inklusive Positivkontrolle - Synthetische nicht-infektiöse DNA zur Ergebnisvalidierung
✅ Quantitative & Qualitative Anwendungen - Geeignet für Forschung, Überwachung und Screening
✅ Kompatibel mit den wichtigsten qPCR-Instrumenten - Fluoreszenznachweis auf dem FAM-Kanal
Inhalt des Kits (50 Tests)
| Komponente Beschreibung | Code | Volumen & Kappenfarbe |
|---|---|---|
| qRT-PCR-Puffer (Sondensystem) | A | 500 µL |
| qRT-PCR-Enzym-Mix | B | 100 µL |
| PCR-Vorlage Verdünnungspuffer | C | 1 mL |
| qRT-PCR-Primer-Mix für H1N1 | D | 100 µL |
| Sonde für H1N1-Subtyp | E | 50 µL |
| Positive Kontroll-DNA (1×10⁸ Kopien/μL) | F | 50 µL |
| RNA-Release-Reagenz (Versuch, extraktionsfreie Methode) | G | 20 Tests |
| Benutzerhandbuch | H | 1 Exemplar |
Wie es funktioniert
Das Kit weist virale RNA durch eine einstufige PCR-Reaktion mit reverser Transkription nach. Während der Amplifikation wird die Die Taq-Polymerase spaltet die doppelt markierte SondeDadurch wird der Fluorophor vom Quencher getrennt, was zu einem Fluoreszenzsignal führt, das proportional zur Menge der vorhandenen Ziel-RNA ist.
Die Fluoreszenz wird bei jedem Zyklus gemessen, so dass Echtzeit-Überwachung des PCR-Prozesses.
Prinzip der Detektion
Ct-Wert (Zyklus-Schwellenwert): Die Anzahl der PCR-Zyklen, die erforderlich sind, damit die Fluoreszenz den Schwellenwert überschreitet. Ein niedriger Ct-Wert weist auf eine höhere anfängliche Zielmenge hin.
Einstellung des Schwellenwerts: Basierend auf der 10-fachen Standardabweichung der Fluoreszenz bei den ersten 3-15 Zyklen (Hintergrund).
Leistung und Abschneidekriterien
| Ergebnis Typ | Kriterien |
|---|---|
| Positiv | Ct ≤ 35 mit einer typischen S-förmigen Amplifikationskurve |
| Verdacht positiv | Ct 35-40 → Wiederholung des Tests empfohlen |
| Negativ | Ct ≥ 40 oder kein Ct + keine Amplifikationskurve |
Positiv- und Negativkontrollen müssen Qualitätskontrollen bestehen. Ct der Negativkontrolle ≥40 und Ct der Positivkontrolle ≤30 bei exponentieller Amplifikation.
Reaktionsprotokoll
Reverse Transkription + PCR (20 μl pro Reaktion)
| Reagenz | Band |
|---|---|
| qRT-PCR-Puffer | 10 μL |
| Enzym-Mix | 2 μL |
| Primer-Mix | 2 μL |
| Sonde | 1 μL |
| RNA-Vorlage oder Kontrolle | 5 μL |
Gesamtvolumen: 20 μL
Thermische Zyklusbedingungen:
| Schritt | Temperatur | Zeit |
|---|---|---|
| Umgekehrte Transkription | 50°C | 30 min |
| Initiale Denaturierung | 94°C | 10 min |
| PCR-Zyklen × 40 | ||
| - Denaturierung | 94°C | 15 Sekunden |
| - Glühen/Verlängerung | 60°C | 1 Minute (FAM) |
Quantifizierung (fakultativ)
Bereiten Sie eine Standardkurve mit seriellen 10-fachen Verdünnungen (10²-10⁷ Kopien/μL) der synthetischen DNA-Kontrolle. Tragen Sie die Ct-Werte gegen log(Konzentration) auf, um die RNA-Kopienzahlen in unbekannten Proben zu interpolieren.
Vorteile der sondenbasierten PCR gegenüber SYBR Green:
| Merkmal | SYBR-Grün | Sondenbasiert (dieses Kit) |
|---|---|---|
| Spezifität | Bindet alle dsDNA | Bindet nur an eine bestimmte Zielsequenz |
| Risiko von Fehlalarmen | Höher | Unter |
| Kosten | Unter | Höher (aber zuverlässiger) |
| Benutzerfreundlichkeit | Einfacher | Erfordert eine Sondenkonstruktion |
Verwendungszweck
Dieses Produkt ist nur für Forschungszwecke. Es ist nicht zugelassen für klinische Diagnostik oder therapeutische Verfahren.






Bewertungen
Es gibt noch keine Bewertungen.